抗氧化乳酸菌的篩選及其特性研究.pdf

1、近幾年來，氧化和抗氧化研究已成為現(xiàn)代生命科學的前沿和熱點，評價和篩選具有抗氧化活性的天然資源已成為生物學、醫(yī)學和食品科學研究的新趨勢。具有益生功能的乳酸菌不僅可以調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、降低血清膽固醇、抑制及降低腫瘤的危險以及免疫賦活等作用。最近，一些研究還發(fā)現(xiàn)乳酸菌具有抗衰老、抗氧化等重要的生物學功能，是開發(fā)天然抗氧化劑的重要資源。 本文以傳統(tǒng)發(fā)酵乳制品中分離出的43株乳酸菌為研究對象，從中篩選出了兩株具有較強抗氧化能力的乳酸桿菌S

2、Y13和LJJ，并且對其體外抗氧化特性進行了全面的評價和對其抗氧化影響因素進行了初步分析，同時，利用API50CH生化方法及16S rDNA序列同源性分析對兩菌株進行了鑒定。為了進一步確認抗氧化效果，利用SY13進行了小鼠體內(nèi)抗氧化驗證實驗。 體外抗氧化實驗分別利用乳酸桿菌SY13和LJJ完整細胞和無細胞提取物對亞油酸過氧化的抑制效果，對DPPH自由基、羥自由基、超氧陰離子自由基清除能力，對過氧化氫的耐受性以及對亞鐵離子的螯合能

3、力和還原活性進行了研究。結(jié)果表明，SY13和LJJ對亞油酸過氧化的最大抑制率分別達到了62.95％和66.16％；兩菌株的無細胞提取物清除超氧陰離子和羥自由基的的效果較好，SY13和LJJ清除超氧陰離子和羥自由基的值分別達到了31.38％、30.24％和31.19％、10.01％，LJJ完整細胞對超氧陰離子和羥自由基沒有清除能力；SY13和LJJ完整細胞對DPPH自由基的清除能力分別為27.5％和23.99，對亞鐵離子的螯合能力分別為3

4、4.12％和50.55％；還原活性分別相當于305μmol/L和294μmol/L的L—cysteine。以上指標測定的結(jié)果說明，這兩株乳酸桿菌具有較好的抗氧化能力，具有潛在的應用價值。 利用API50CH鑒定系統(tǒng)及16S rDNA序列同源性分析，最終鑒定結(jié)果SY13為Lactobacillus casei subsp.casei，LJJ為Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus。

5、 對SY13、LJJ兩菌株影響抗氧化活性的因素進行了初步分析。兩菌株趨勢基本相同，培養(yǎng)時間為18 h時，它們清除羥自由基能力達到了最大效果；隨著活菌數(shù)的逐級升高，清除效果也不斷加大；對無細胞提取物試驗所作的兩個滅活溫度和時間組合梯度65℃、30 min和100℃、30 min處理后，清除羥自由基能力隨著溫度的升高，出現(xiàn)了下降，這可能是由于100℃熱處理后，菌體內(nèi)抗氧化酶失活有關(guān)。 通過進一步的研究發(fā)現(xiàn)，利用SY13活菌制劑飼

6、喂由D—半乳糖誘導的衰老模型ICR小鼠可有效的提高衰老小鼠體內(nèi)的抗氧化水平，增強抗氧化酶活性，減少過氧化脂質(zhì)含量，降低氧化應激水平，同時可以降低血脂水平，改善血脂代謝，減少動脈粥樣硬化的危險性。主要表現(xiàn)為可顯著提高衰老小鼠血清和肝臟組織中谷胱甘肽過氧化物（GSH—Px）和提高超氧化物歧化酶（SOD）活力，降低脂質(zhì)過氧化物丙二醛（MDA）含量。此外，還顯著降低衰老小鼠體內(nèi)血清和肝臟組織中總甘油三酯（TG）低密度脂蛋白（LDL），提高高密度