固定化蛋白酶的制備及松仁多肽加工工藝研究.pdf

1、紅松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc)，是主產(chǎn)于中國小興安嶺的珍貴樹種。紅松仁是一種營養(yǎng)價值很高的果品，富含蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、維生素、礦物質(zhì)及其它生理活性物質(zhì)，具有廣闊的應(yīng)用開發(fā)潛力。
　　本文以紅松松仁為原料，利用現(xiàn)代分離分析手段，對松仁蛋白的提取工藝、酶解條件進(jìn)行優(yōu)化，又對最佳蛋白酶進(jìn)行固定化研究再用其制備松仁多肽，主要結(jié)果如下：
　　1、采用超聲波輔助堿提酸沉法提取松仁蛋白，最佳工藝條

2、件依次為:料液比1∶24.61、pH值10、提取溫度48.3℃、超聲時間100min。松仁蛋白提取率為233.23 mg/g。超聲波輔助提取法可以有效地提高松仁蛋白質(zhì)的提取率，縮短反應(yīng)周期。
　　2、選擇國產(chǎn)堿性、中性蛋白酶、Alcalase2.4L堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶作為松仁蛋白酶解備用酶，對松仁蛋白進(jìn)行酶解效果研究，根據(jù)其水解程度，確定Alcalase蛋白酶為松仁蛋白酶解的最佳用酶。通過響應(yīng)面法優(yōu)化得到此酶作用下的最佳酶解條

3、件為:pH值8.0、水解溫度53℃、酶與底物比8800 U/g蛋白、底物濃度1.2％、酶解的時間50min。在最佳酶解的條件下水解度(DH)為43.15％。酶與底物比對其酶解過程具有極顯著性影響，其次是pH。
　　3、使用交聯(lián)-吸附法對Alcalase2.4L蛋白酶進(jìn)行固定化，研究Alcalase蛋白酶固定化工藝，得到了載體與交聯(lián)劑濃度、載體交聯(lián)時間、給酶量、pH、固定化時間的最佳固定化條件:殼聚糖濃度2.5％、戊二醛濃度0.4％

4、、載體交聯(lián)時間4h、給酶量915U/g載體、pH9.4、固定化時間8h，固定化酶活力回收率為54.35％。同時對固定化酶及溶液酶的米氏常數(shù)、最適溫度、pH、熱穩(wěn)定性等性質(zhì)進(jìn)行了研究和比較。固定化Alcalase蛋白酶重復(fù)使用6次，相對活力仍在60％以上。說明固定化Alcalase蛋白酶具使用特性，可用作工業(yè)化生產(chǎn)。
　　4、研究了固定化Alcalase2.4L蛋白酶酶解松仁蛋白的工藝。對酶解條件進(jìn)行了優(yōu)化，得到固定化Alcalas