芝麻粕發(fā)酵條件優(yōu)化及其小肽抗氧化活性研究.pdf

1、芝麻粕營(yíng)養(yǎng)豐富，氨基酸組合全面，但含有大量植酸和單寧，限制了芝麻餅粕在畜禽日糧中的廣泛應(yīng)用。微生物發(fā)酵法在降解抗?fàn)I養(yǎng)因子和生產(chǎn)活性肽方面解決了物理法、化學(xué)法、酶制劑法存在的很多弊端和缺點(diǎn)，對(duì)芝麻粕進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用具有現(xiàn)實(shí)意義。本文對(duì)芝麻飼用品質(zhì)發(fā)酵改良、芝麻肽的分離純化及抗氧化活性進(jìn)行了初步研究，結(jié)果如下：
　　 1、芝麻粕飼用品質(zhì)發(fā)酵改良研究。選用枯草芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌多個(gè)菌種，通過(guò)單因素試驗(yàn)和L9(34)正交試驗(yàn)，優(yōu)化微

2、生物發(fā)酵條件，以降低發(fā)酵芝麻粕中植酸和揮發(fā)性鹽基氮含量，提高粗蛋白、酸溶蛋白等有益成分為目標(biāo)。結(jié)果表明，最優(yōu)發(fā)酵條件為：料水比(W：V)1:0.8、R-02與KG-109混菌發(fā)酵，發(fā)酵溫度為30℃、R-02與KG-109接種比例2:1、接種量8％、時(shí)間10d。在此條件下發(fā)酵后植酸含量為0.08％，植酸降解率達(dá)到86.21％。粗蛋白含量為49.85％、酸溶蛋白為9.07％、揮發(fā)性鹽基氮為207.55mg·100g-1。
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3、芝麻肽的分離純化研究。通過(guò)單因素試驗(yàn)優(yōu)化芝麻肽提取條件，以芝麻肽粗提液的肽含量為指標(biāo)。結(jié)果顯示最佳提取條件為料水比1:6，30℃靜置浸提15min。芝麻肽粗提液通過(guò)SephadexG-15分離純化，得到三個(gè)分子量不同的小肽，經(jīng)測(cè)定分別是3肽、4肽和6肽。
　　 3、芝麻肽的抗氧化活性研究。體外抗氧化分別采用二苯基苦基苯肼法(DPPH)測(cè)定其清除DPPH活性、水楊酸法測(cè)定其清除羥基自由基活性、鐵離子還原能力法測(cè)定其的總還原能力。體

4、內(nèi)抗氧化活性通過(guò)小鼠灌胃試驗(yàn)，選取48只4周齡健康昆明小鼠，采用隨機(jī)分組法，每組12只小鼠，分為四組(對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組)，分別灌胃生理鹽水、0.1g/kg·d、0.2g/kg·d和0.4g/kg·d芝麻6肽，連續(xù)灌胃28d，第29d處死小鼠后取血和器官進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，測(cè)定器官重、MDA、SOD、GSH-PX和CAT活力。結(jié)果表明，在1mg/mL濃度時(shí)小肽粗提液、3肽和4肽的DPPH自由基清除率均達(dá)到90％，在此濃度下6肽的

5、DPPH自由基清除率僅達(dá)到80％；在0.6mg/mL濃度時(shí)3肽和4肽的·OH自由基清除率均達(dá)到100％，在此濃度下小肽粗提液和6肽的·OH清除率均為90％；4mg/mL濃度的小肽粗提液、4肽、6肽和2mg/mL濃度時(shí)3肽的總還原力相當(dāng)于0.5mg/mL谷胱甘肽。劑量對(duì)小鼠的體重和各器官的重量沒(méi)有顯著影響(P>0.05)，芝麻6肽能夠有效降低血清和肝臟中MDA的含量，可以顯著提高肝臟中SOD、GSH-PX和CAT活力，并呈現(xiàn)一定的劑量效應(yīng)