菜籽肽制備及其抗氧化活性的研究.pdf

1、油菜是我國(guó)重要的油料作物之一，菜籽粕中含有菜籽蛋白，我國(guó)現(xiàn)在多將其用于飼料和肥料，這造成了一定的資源浪費(fèi)，因此加強(qiáng)對(duì)其的升值加工研究是一項(xiàng)有重要意義的工作。 本文以脫脂菜籽粕為原料制備菜籽清蛋白，再用堿性蛋白酶與木瓜蛋白酶對(duì)菜籽清蛋白進(jìn)行分步水解制備菜籽肽粗品，試驗(yàn)獲得了較好的菜籽清蛋白提取條件，并優(yōu)化得到了較好的分步水解制備菜籽肽粗品的條件，同時(shí)對(duì)菜籽肽粗品的抗氧化活性進(jìn)行了研究。試驗(yàn)獲得的主要結(jié)論如下： (1)菜籽清

2、蛋白的制備：取100g脫殼脫脂干燥菜籽粕于2L的燒杯中，加入1000mL蒸餾水，40℃下攪拌浸提1h，6000 rpm、4℃離心20 min，過(guò)濾上清液得到沉淀，按上述步驟再進(jìn)行相同的浸提操作3次。合并4次所得的上清液，用1mol/LHCl沉淀上清液，調(diào)pH至4.0后6000 rm、4℃離心10 min獲得沉淀，將沉淀置于蒸餾水中透析24h，并在第8h、16h分別更換蒸餾水，然后真空冷凍干燥即可得到蛋白質(zhì)含量達(dá)82.05％的清蛋白。

3、 (2)菜籽清蛋白主要功能性質(zhì)如下：吸水性326.88％，吸油性為4.30mL油/g清蛋白，起泡性為66.00％，乳化性及乳化穩(wěn)定性分別為29.80％和35.53％。 (3)本文選用堿性蛋白酶和木瓜蛋白酶對(duì)菜籽清蛋白進(jìn)行分步水解研究，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合正交試驗(yàn)得到雙酶水解的最佳條件為：取底物濃度3.5％的清蛋白，先用堿性蛋白酶4000U/g于溫度55℃，pH8.0的條件下，水解3h，再加入木瓜蛋白酶3000U/g，在

4、50℃，pH5.5的條件下水解3h，水解度可達(dá)到40.17％。 (4)菜籽肽粗品具有較強(qiáng)的還原能力，其還原能力隨其濃度的增加而增強(qiáng)。菜籽肽粗品具有清除超氧陰離子和抑制羥自由基的作用，其對(duì)超氧陰離子的的IC50值為6.60 mg/mL，其抗氧化作用均隨菜籽肽粗品濃度的增加而增強(qiáng)，并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。通過(guò)灌胃小鼠菜籽肽粗品100、200、400 mg/kg·d40天，結(jié)果顯示可以提高小鼠抗氧化能力，使小鼠肝和腎中的超氧化