竹筍短肽制備及其抗氧化活性研究.pdf

1、竹筍擁有豐富的營養(yǎng)價值,其中蛋白質(zhì)干物質(zhì)含量在14％以上,本論文確定了酶法制備竹筍短肽的最優(yōu)工藝,通過超濾分級得到不同分子量范圍的竹筍短肽,并對其體外抗氧化活性進行了研究。
　　 比較了水提法、堿溶酸沉法、纖維素酶法三種方法制備竹筍蛋白的提取率和純度,最終確定堿溶酸沉法為最適提取方法,其工藝條件為:料液比1:4、浸提溫度45℃、堿溶pH9、酸沉pH4.2,此時蛋白質(zhì)提取率為17.19±0.21％,竹筍蛋白純度57.52％。對竹筍

2、蛋白分子量分布進行分析,10kDa以上的蛋白含量為84.30％。
　　 對竹筍蛋白酶解過程中酶制劑的種類、酶用量、底物濃度、pH、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間等影響因素進行了系統(tǒng)地研究,通過二次正交旋轉(zhuǎn)組合實驗建立了短肽得率(TCA-NSI)與各因素的同歸模型,通過模型計算出了最佳工藝參數(shù):溫度58℃、酶解時間179min、酶用量9000U／g、底物濃度2％。在此條件下,體系TCA-NSI為70.69±0.57％,水解度(DH)為25.0

3、7±0.71％。
　　 采用超濾法對竹筍短肽進行精制,以膜通量和膜效能為指標(biāo)考察了操作壓力、料液濃度和操作溫度對超濾效果的影響。確定了一級超濾(5kDa)的最適條件:操作壓力20psi,料液濃度6％,操作溫度40℃。將<5kDa的超濾液作為二級超濾(1kDa)的起始液繼續(xù)考察操作壓力、料液濃度和操作溫度對二級超濾效果的影響,確定了二級超濾的最適操作條件:操作壓力25psi,料液濃度6％,操作溫度35℃。超濾后不同分子量竹筍短肽所

4、占比例:分子量<1kDa的竹筍短肽占69.51％,1-5kDa的竹筍短肽占12.33％,>5kDa的竹筍短肽所占18.16％。
　　 采用六種測定方法對比了不同分子量范圍竹筍短肽的抗氧化能力,實驗結(jié)果表明抗氧化活性的強弱順序為:BSP-Ⅳ>BSP-Ⅱ>BSPs>BSP—Ⅲ>BSP-Ⅰ。其中BSP-Ⅳ對DPPH、羥自由基、ABTS自由基的IC50值分別為1.03±0.01％、14.47±0.08％、1.07±0.06％。通過對照實