低產(chǎn)尿素黃酒酵母的選育及黃酒發(fā)酵工藝研究.pdf

1、建立了高效液相色譜法(HPLC)測定黃酒中微量尿素的方法，對高效液相色譜法與傳統(tǒng)尿素檢測方法二乙酰肟法和對二甲氨基苯甲醛(PDAB)法進行了比較。 以黃酒酵母HJ1615為出發(fā)菌株，采用物理和化學連續(xù)誘變的方法，選育低產(chǎn)尿素突變菌株同時對黃酒的發(fā)酵工藝進行了研究。 結果如下： 采用HPLC測定黃酒中微量尿素的方法：采用PinnacleIIAmino色譜柱，使用全波長二極管陣列檢測器在203nm下進行出峰掃描，以乙

2、腈和水的混合相95:5(V:V)作為流動相，在柱溫為40℃時，流速為1mL/min進行尿素測定。 通過對HPLC法與二乙酰肟法和PDAB法的比較，結果表明：HPLC法尿素的最低檢出限降至2mg/L，方法的檢測范圍擴大至100mg/L，回收率在81.31-90.60％之間，相對標準偏差4.05％，同時方法的重復性和穩(wěn)定性都高于傳統(tǒng)方法，而且操作簡單快速，適用較廣。 使用He-Ne激光和亞硝基胍(NTG)對出發(fā)菌株HJ161

3、5進行多輪誘變，對菌株采用了半理化的篩選方法：以含有刀豆氨酸、精氨酸和鳥氨酸的培養(yǎng)基為篩子進行目的菌株篩選，得到低產(chǎn)尿素黃酒酵母突變株。該菌株在酒精度、總酸、氨基態(tài)氮、風味物質(zhì)等關鍵參數(shù)上保持了親株的優(yōu)良特性，同時產(chǎn)生的尿素比親株低50％以上。 研究發(fā)酵過程中的發(fā)酵溫度，接種量以及添加無機鹽的種類和濃度對尿素生成的影響。實驗發(fā)現(xiàn)，提高發(fā)酵溫度和菌種接種量可以加速尿素的產(chǎn)生，但對發(fā)酵完成后尿素的總量沒有顯著性影響。添加無機鹽是降低