珠蚌抗氧化肽的加工工藝研究.pdf

1、我國是珍珠生產(chǎn)大國,采珠后大量珠蚌被丟棄,利用率低,污染環(huán)境。而研究表明,珠蚌肉質(zhì)是很好的蛋白原料。本論文將采用取珠后珠蚌肉為原料,選用兩種方法,并優(yōu)化、比較兩種方法制備的多肽的區(qū)別。以此為基礎(chǔ),設(shè)計一個生產(chǎn)珠蚌多肽粉工廠。主要研究結(jié)果如下:
　　 1、考察酶解液抗氧化性及水解度,對水解珠蚌粗蛋白的酶種類進(jìn)行選擇,最終確定木瓜蛋白酶為最適水解蛋白酶。然后,以DPPH抑制率、·OH清除率及蛋白水解度作為評價指標(biāo),研究珠蚌抗氧化肽的

2、制備工藝。在單因素基礎(chǔ)上,通過三個指標(biāo)的綜合考慮,設(shè)計L18(37)多指標(biāo)正交試驗,對制備工藝進(jìn)行優(yōu)化,得出最佳工藝條件。結(jié)果表明,最佳條件為:酶解溫度60℃、酶解時間5h、料液比3:10(w/v)、酶解pH6.5、加酶量6000U/g,制得的多肽DPPH·抑制率78.79％,·OH清除率49.7%,水解度23.09%。
　　 2、采用超聲波-酶法制備珠蚌抗氧化肽,先以抗氧化性為指標(biāo),得到最佳制備工藝,即先超聲波處理,再使用木瓜

3、蛋白酶水解。經(jīng)過工藝優(yōu)化,得到最佳超聲波-酶解條件為:超聲時間40min、超聲溫度50℃、超聲功率100W、料液比3:20(w/v)。超聲后進(jìn)行酶解,酶解條件為溫度60℃、時間5h、酶解pH6.5、加酶量6000U/g,在此超聲條件下處理的珠蚌制備的抗氧化肽,DPPH·抑制率為73.84%,·OH清除率為63.14%。在此基礎(chǔ)上研究超聲波對酶水解的影響,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過超聲作用后,酶水解時間縮短1小時,料液比也由原來的3:10縮小為3:20(v

4、/w)。
　　 3、在得到兩種方法的最佳制備工藝后,采用5種不同方法分別對酶法、超聲波-酶法制備的珠蚌抗氧化肽進(jìn)行比較。從電泳、柱層析結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)兩種分子量分布大致相同,說明兩種方法得到的多肽在一定程度上是相同的。而從真蛋白含量、產(chǎn)品回收率、EC50的測定結(jié)果得出,單位質(zhì)量中,超聲波-酶法制備的珠蚌抗氧化肽量較酶法制備的大,推斷出超聲波能促進(jìn)珠蚌蛋白的溶解,增加蛋白與木瓜蛋白酶的接觸概率,促進(jìn)蛋白的水解,從而提高產(chǎn)量。