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1、鄰苯二甲酸二(2乙基己)酯單克隆抗體的制備及ELISA檢測方法的建立PreparationofMonoclonalAntibodyagainstPhthalateesters(2一ethylcaproic)andEstablishmentofanIndirectCompetitionELISAMethod研究生:馮云飛導(dǎo)師:王捍東教授學(xué)科:臨床獸醫(yī)學(xué)MSCandidate:FengYunFeiSupervisor:ProfWangHan
2、dong揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院臨床獸醫(yī)學(xué)教研室2013年6月?lián)P州大學(xué)碩士學(xué)位論文IIABSTRACTPhthalate(2ethylcaprice)phthalate(DEHP)belongtotheophthalmicacidestercompounds,fromlargeoutput,increasingthematerialsoftnesscharacteristicsofgood,cheap,widelyusedinplasticpr
3、oductsThiskindofmaterialisakindofenvironmentalhormone,areclassifiedassuspectedenvironmentalhormones,highdosesofDEHPinthehumanbodycantcompletelymetabolism,causingaccumulationforalongtimetostayinthehumanbodycancausesideeff
4、ects,harmtohealthTheEuropeanUnion,theUnitedStatesenvironmentalprotectionagency(pea)hasalreadypassedsomelawsandregulationstostrictlycontroltheplasticizertestingstandard,andarenowusingcitricacidesterepoxyacidesterssuchasse
5、curityenvironmentalprotectionplasticizerdoupdatesubstituteproductsSomeregulatorymeasuresnOWbeingdevelopedinChinaDEHPhasestablishedavarietyofdetectionmethodsathomeandabroad,suchashighperformanceliquidchromatograpHy(HPLC),
6、gaschromatograpHy(GS),gaschromatograpHymassspectrometry(GCMS);themethodisaccurate,sensitiveandeffective,butallneedexpensiveinstrument,professionaloperationskillsandcomplexsamplehandlerAndELISAmethodCansolvetheseproblems,
7、itisasimple,accurate,efficient,cheap,andspecificdetectionmethod,suitableforrapidscreeningofbulksamplesThisstudywithmonoclonalantibodyandenzymelinkedimmunosorbentassaytechniqueasthefoundationthroughtheproteinsynthesisofar
8、tificialantigenofDEHPconnectiontechnologypreparationofthehighsensitivitystrongspecificityhightiterofantibodyandestablishtheDEHPCeliadetectionmethod1DEHPsynthesisandidentificationofartificialantigensThroughfirstafteraddin
9、gnitroDEHPagainthroughthediazolemethodcouplinglinkswithproteins,preparationofartificialantigenofDEHPBSAandDEHPHSA,theultravioletscanningandimmunologicalmethodcouplingsuccessfulpreliminaryidentificationDEHPBSAasimmunogeni
10、c,DEHPHSAasthepackageisoriginal2DEHPsinglepreparationUsedDEHPBSAroutineimmunizationofBALB/cmice,afterfivefreeserumtiter1:12000aboveByhybridismtechnologyandenzymelinkedimmunetechnologyCalllast1strainscreeningforstab1eprod
11、uctionofDEHPspecificitymonoclonalantibodyhybridism,oneofthe4C2straincellssecreteantibodiestoDEHPexhibiteds仃ongcombiningabilityusingtheinvivoinducedbod%the4C2hybridisminjectedintoabdominalcavityofmice,preparationofDEHPasc
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