鄰苯二甲酸二乙基己基酯對鼠胎肺發(fā)育的影響及作用機制.pdf

1、目的：研究孕鼠在不同鄰苯二甲酸二乙基己基酯（DEHP）暴露劑量下對子鼠胎肺發(fā)育的影響，并探討DEHP影響肺發(fā)育的作用機制。 方法：（1）實驗動物和分組：Sprague-Dawley大鼠（體重250 g-300g）受孕后，將34只孕鼠隨機分成4組：對照組（n=8）、低劑量組（n=8）、中劑量組（n=8）、高劑量組（n=10）。受孕后第12天（GD12）開始每天給孕鼠玉米油或含不同劑量DEHP的玉米油0.5ml灌胃：對照組給予玉米油

2、（DEHP0mg/kg/day）；低劑量組給予DEHP10mg/kg/day；中劑量組給予100mg/kg/day；高劑量組給予DEHP750mg/kg/day。取自然分娩的第1天子鼠，每籠隨機取2只子鼠（雌雄各一只），給子鼠腹腔注射戊巴比妥鈉（35mg/kg-1bw），麻醉后處死子鼠。（2）測量子鼠體重。（3）光鏡下觀察HE染色后右肺中葉組織病理學改變并進行形態(tài)學分析，測定輻射狀肺泡計數(shù)（RAC）和肺間質(zhì)比例，透射電鏡觀察左肺超微結(jié)構(gòu)

3、變化。（4）免疫組織化學LDP法檢測基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）及其特異性組織抑制劑（TIMP-2）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的表達。 結(jié)果：（1）孕鼠染毒情況：各組孕鼠均無死亡，但高劑量組有2只孕鼠發(fā)生流產(chǎn)，予以除外。在GD12時，各組孕鼠體重比較無差別（P>0.05），GD22時，高劑量組孕鼠體重明顯低于其他各組（P<0.01），中、低劑量組與對照組比較無顯著性差異（P>0.05）。（2）子鼠體重比較：與對照組體重（

4、6.80±0.73g）相比，各實驗組子鼠體重明顯下降（P<0.01），中劑量組和高劑量組體重（5.59±0.86g，5.48±0.81g）下降比低劑量組（6.19±0.51g）更明顯（P<0.05）。（3）光鏡下RAC和肺間質(zhì)比例：低劑量組、中劑量組與對照組比較無顯著性差異（P>0.05），但高劑量組出現(xiàn)肺間質(zhì)增厚、間質(zhì)細胞增多，肺泡數(shù)目減少，RAC減小，肺間質(zhì)比例增大，與對照組比較有顯著性差異（P<0.05）。（4）肺電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察

5、：對照組、低劑量組和中劑量組組織均無明顯病理性改變，但高劑量組有一些病理性變化：肺泡Ⅱ型細胞質(zhì)深染，核固縮，絨毛較少，板層小體增多，形態(tài)不規(guī)則。（5）各實驗組的VEGF與對照組比較無顯著性差異（P>0.05），MMP-2的表達隨孕鼠暴露DEHP劑量的增加而增加，高、中、低劑量組MMP-2的表達高于對照組（P<0.001），各實驗組間相比較也存在顯著性差異（P<0.001）；TIMP-2的表達隨劑量增加而減少，當孕鼠暴露DEHP劑量達到1

6、00mg/kg/day時，TIMP-2的表達出現(xiàn)下降，僅高劑量組TIMP-2的表達與對照組比較有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。 結(jié)論（1）孕鼠大劑量DEHP染毒時對自身有明顯的毒性作用。 （2）孕鼠DEHP染毒時對子鼠生長有抑制作用，抑制程度與劑量成正比，高暴露劑量下子鼠的體重下降更明顯。 （3）孕鼠高劑量DEHP暴露時有抑制子鼠肺發(fā)育的作用。 （4）MMP-2的表達隨孕鼠暴露DEHP劑量的增加而增加，而T