牛膝礦物元素含量分析及其多糖成分的提取和免疫學(xué)活性的研究.pdf

1、牛膝始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，種植和藥用歷史悠久。牛膝類藥材具有多種功效，故在臨床上得到廣泛應(yīng)用。近二十年來(lái)，對(duì)其藥用成分的研究取得很大發(fā)展，不斷有新的化學(xué)成分被發(fā)現(xiàn)和報(bào)道并且藥理作用研究也日趨深入。本研究著重探討牛膝類藥材的礦物元素、多糖成分的提取方法及其生物學(xué)活性，為牛膝類藥材的質(zhì)量控制以及在畜禽業(yè)的應(yīng)用提供一定的參考和依據(jù)。試驗(yàn)分為以下五個(gè)部分： 試驗(yàn)一、不同品種牛膝生藥材12種元素的測(cè)定采用ICP-MS、AFS以及FAAS法

2、共測(cè)定牛膝中Zn、Mn、K、Fe、Ca、Cu、Co、Sr、Pb、As、Hg、Cd12種礦物元素的含量。結(jié)果，以上三種方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于5％，加標(biāo)回收率范圍在88.23％～102.98％之間，不同品種牛膝生藥材的相應(yīng)元素含量之間多數(shù)存在顯著或極顯著差異。表明測(cè)定方法準(zhǔn)確可靠，牛膝品種不同，其元素含量差異也較大，富含多種人和動(dòng)物所需的礦物元素，同時(shí)也存在某些重金屬元素超標(biāo)現(xiàn)象。 試驗(yàn)二、不同提取方法對(duì)川牛膝多糖提取率

3、的影響通過(guò)熱回流、超聲、酶解超聲3種方法提取RCP，電鏡掃描觀察經(jīng)過(guò)以上方法提取后川牛膝藥渣表面結(jié)構(gòu)的改變情況。結(jié)果，熱回流法、超聲法和酶解超聲法所得RCP的提取率依次為8.9％、20.81％和31.13％，提取率高低與藥渣表面結(jié)構(gòu)的改變有直接關(guān)系。 試驗(yàn)三、酶解超聲法提取川牛膝多糖的正交試驗(yàn)研究采用正交試驗(yàn)法確定了RCP酶法提取和超聲提取的最佳工藝。纖維素酶預(yù)處理的最佳條件：酶解時(shí)間為1h、酶的用量為15 U/g、pH值為5、

4、酶解溫度為50℃，超聲提取的最佳條件：樣品粒度為20目、料液比(W/V)為1:40、超聲時(shí)間為20 min。 試驗(yàn)四、牛膝多糖對(duì)環(huán)磷酰胺致小鼠免疫抑制的影響采用Cy制作小鼠免疫抑制模型，然后給以不同劑量ABPS連續(xù)治療10 d。結(jié)果，與Cy對(duì)照組相比，正常小鼠和免疫抑制小鼠腹腔注射ABPS后，胸腺指數(shù)、脾指數(shù)、白細(xì)胞數(shù)以及CD4+/CD8+均明顯升高，并呈現(xiàn)劑量.效應(yīng)關(guān)系。這提示ABPS能對(duì)抗Cy致小鼠的免疫抑制，并能增強(qiáng)正常小

5、鼠的免疫功能。 試驗(yàn)五、牛膝多糖對(duì)肉仔雞球蟲(chóng)免疫的影響10日齡雛雞免疫接種柔嫩艾美耳球蟲(chóng)活卵囊(2×103個(gè)/雞)，并且于11、14和17日齡分別肌肉注射ABPS(劑量分別為200、100、50mg/kg b.w.)，第18 d，每只雞經(jīng)口給以5×104個(gè)柔嫩艾美耳球蟲(chóng)活卵囊。結(jié)果表明，ABPS可以一定程度地抑制肉仔雞因球蟲(chóng)感染而引起的體重減輕，并能減輕盲腸病變，減少糞便卵囊排出量，增強(qiáng)肉仔雞免疫水平，ABPS以高、中劑量(20