大黃素對(duì)白蛋白誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響.pdf

1、目的：
　　 探討大黃素對(duì)人白蛋白誘導(dǎo)的人近端腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)發(fā)生上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化的影響，以及該過(guò)程是否存在對(duì)TGF-β1/Smad信號(hào)通路的調(diào)控而發(fā)揮作用。
　　 方法：
　　 以體外培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞為研究對(duì)象，試驗(yàn)分為空白對(duì)照組、大黃素對(duì)照組、白蛋白誘導(dǎo)組、大黃素干預(yù)組。HK-2細(xì)胞在上述各處理因素下分別培養(yǎng)0、12、24、48h。在倒置相差顯微鏡下觀察及比較細(xì)胞形態(tài)差異；RT-PCR檢測(cè)α

2、-SMA、E-cadherin、TGF-β1、Smad2、FN mRNA的表達(dá)水平變化。
　　 結(jié)果：
　　 5mg/ml人白蛋白刺激HK-2細(xì)胞48h內(nèi)，光鏡下可見(jiàn)細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，胞體變細(xì)長(zhǎng)，細(xì)胞之間間隙增大；RT-PCR檢測(cè)α-SMA、FGF-β1、Smad2、FNmRNA的表達(dá)水平逐漸增高，E-cadherin mRNA的表達(dá)水平逐漸減少，均較空白對(duì)照組有顯著差異(P<0.01)。而使用20μg/ml大黃素和人白

3、蛋白共同孵育的HK-2細(xì)胞，其形態(tài)改變與白蛋白誘導(dǎo)組相似，但改變程度較小；RT-PCR檢測(cè)α-SMA、TGF-β1、Smad2、FN mRNA的表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)亦逐漸增強(qiáng)，E-cadherinmRNA仍則逐漸減弱，但大黃素干預(yù)組上述指標(biāo)的表達(dá)顯著弱于白蛋白誘導(dǎo)組(P<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 一定濃度的人白蛋白可以誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞α-SMA、FGF-β1、Smad2、FN mRNA的表達(dá)上調(diào)，下調(diào)E-ca