氯丙嗪的法醫(yī)毒物動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　 1．建立生物檢材中氯丙嗪的氣相色譜和氣相色譜/質(zhì)譜檢測(cè)方法；
　　 2．建立氯丙嗪的死后分布、死后再分布、死后彌散、分解動(dòng)力學(xué)動(dòng)物模型；
　　 3．研究氯丙嗪在動(dòng)物體內(nèi)的死后分布、死后再分布、死后彌散和分解動(dòng)力學(xué)分布規(guī)律，為氯丙嗪中毒（死）案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.死后分布研究
　　 1.1．1氯丙嗪在大鼠體內(nèi)的死后分布研究：雄性SD大鼠6只，體

2、重200g±10g 經(jīng)灌胃勻速注入6LD50（1350mg/kg）氯丙嗪。觀察給藥到死亡時(shí)的生命體征的變化以及中毒癥狀，待呼吸和心跳全部消失時(shí)，迅速解剖動(dòng)物，取大腦、心、肝、脾、肺、腎、心血等冷凍保存，堿性乙醚提取，氣相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)氯丙嗪。
　　 1.2．2 氯丙嗪在家兔體內(nèi)的死后分布研究：家兔6只，實(shí)驗(yàn)前隔夜禁食。經(jīng)灌胃勻速注入8LD50（5990.4 mg/kg）氯丙嗪。待呼吸和心跳全部消失時(shí)，迅速解剖

3、動(dòng)物，取大腦、心、
　　 肝、脾、肺、腎、心血等冷凍保存，堿性乙醚提取，氣相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)氯丙嗪。
　　 2.死后再分布研究：雄性犬6只，固定于犬臺(tái)上，插胃管，2min內(nèi)注入1/2LD50劑量（201.6mg/kg，按體表面積折算）氯丙嗪。2h后缺氧處死，仰臥位置于室溫下（20℃），分別 在死后0h、2h、4h、8h、12h、24h、48h、72h、96h 取撿材，-20℃冰箱保存待檢。解凍，液-液萃

4、取血液和各組織臟器，氣相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)氯丙嗪。
　　 3.死后彌散研究：家兔15只，隨機(jī)分為5組。實(shí)驗(yàn)前隔夜禁食，將其仰臥位固定于兔，插胃管，然后處死；處死1h后，經(jīng)灌胃勻速注入LD50（748.8mg/kg）氯丙嗪，分別于3h、1d、2d、4d和6d 各解剖一組（3只）家兔，取大腦、心、肝、脾、肺、腎、左右后肢肌、心血、周?chē)?、膽汁、尿液、玻璃體液，-20℃冰箱保存待檢。解凍，液-液萃取血液和各組織臟器，氣

5、相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)氯丙嗪。
　　 4.分解動(dòng)力學(xué)研究：雄性犬6只，固定于犬臺(tái)上，插胃管，2min內(nèi)注入LD50劑量（40.2mg/kg）氯丙嗪，給藥體積為20mL。灌胃后2h，經(jīng)股動(dòng)脈插管采血，肝素抗凝；缺氧處死，取心血和肝臟。每只犬血分四等份分別置于20℃、4℃、-20℃、20℃（加NaF 至1％），每只犬肝分四等份分別置于20℃、4℃、-20℃、20℃（4％甲醛），于第0d、7d、54d、90d、150d、

6、280d、320d 氣相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)其中氯丙嗪。采用WinNonlin藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理平均藥物濃度，擬合分解動(dòng)力學(xué)方程，計(jì)算分解半衰期。
　　 5. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS11.5 統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±S）表示，t檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果:
　　 1.氣相色譜和氣相色譜/質(zhì)譜檢測(cè)：GC/MS分析氯丙嗪的特征離子m/z為86、233、272、318。心血中氯丙嗪氣相色譜檢測(cè)

7、的回歸方程、線(xiàn)性檢測(cè)范圍、相關(guān)系數(shù)、回收率、最低檢出濃度分別為Y=4.2403X＋0.2044 (μg/mL)、0.1～10μg/mL、0.9927、99.03±5.20％、0.1μg/mL。肝臟中氯丙嗪氣相色譜檢測(cè)的回歸方程、線(xiàn)性檢測(cè)范圍、相關(guān)系數(shù)、回收率、最低檢出濃度分別為Y=10.38X＋0.2784 (μg/mL)、0.1～10μg////mL、0.9815、98.26±2.50 ％、0.1μg/mL。
　　 2.死后分

8、布：6LD50劑量灌胃大鼠10～11h 死亡，體內(nèi)氯丙嗪含量由高到低分別為：胃（2249.18±164.23μg/g）＞肝（880.17±8.62μg/g）＞肺（571.09±0.82μg/g）＞腦（108.62±27.38μg/g）、脾（105.37±17.64μg/g）、腎（100.33±0.3 4μg/g）、心（95.11±4.63μg/g）＞心血（6.31±1.87μg/mL）。
　　 8LD50劑量灌胃家兔5～ 6h

9、死亡， 體內(nèi)氯丙嗪含量由高到低分別為：胃(3823.24±662.66μg/g）＞肝(489.67±230.44μg/g)、肺(396.16±237.70μg/g)＞腦
　　 (251.24±98.01μg/g)、脾(267.62±87.46μg/g)、腎(289.01±153.35μg/g)(117.88±52.79μg/g)＞心血(5.86±1.90μg/ mL)。
　　 3333.... 死后再分布：1/2LD50

10、氯丙嗪在灌胃致死犬心血中的濃度呈先升高后降低趨勢(shì)，在肝 臟中的濃度呈升高趨勢(shì)。心血中氯丙嗪含量在死后4h 之內(nèi)穩(wěn)定，8h時(shí)顯著升高（LSD， P＜
　　 0.05），48h～96h內(nèi)又逐漸降低。死后與死亡當(dāng)時(shí)心血氯丙嗪濃度比（C 死后血/C 死亡當(dāng)時(shí)血）達(dá)0.47～2.28；肝臟中氯丙嗪含量在24h 之內(nèi)穩(wěn)定，48h～96h內(nèi)顯著升高（LSD， P＜0.05），死后與死亡當(dāng)時(shí)肝臟氯丙嗪濃度比（C 死后肝/C 死亡當(dāng)時(shí)肝）達(dá)1.5

11、7～6.74；在染毒犬死后96h內(nèi)，肌肉中氯丙嗪濃度在死后無(wú)顯著性變化（LSD， P﹥0.05）。
　　 4.死后彌散：LD50氯丙嗪灌胃染毒家兔3h后，大腦、心、肝、脾、肺、腎、左、右后 肢肌和心血中均檢出氯丙嗪成份，且脾中氯丙嗪含量最高。尿和膽汁中在6d后仍未檢出氯丙嗪成份。
　　 5.分解動(dòng)力學(xué)：氯丙嗪在檢材中的分解動(dòng)力學(xué)符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程一室開(kāi)放模型，Ct=C0e-kt表示。20℃、4℃、-20℃、20℃（加Na

12、F 至1％）保存犬血中氯丙嗪濃度第7d時(shí)犬血中氯丙嗪濃度下降至最初濃度的57.6％、97.3％、53.6％、80.2％，20℃、4℃、-20℃、20℃（加NaF至1％）保存280d時(shí)犬血中氯丙嗪濃度分別顯者下降至最初濃度的29.80％、36.51％、19.62％、39.29％。20℃、4℃、-20℃、20℃（4％甲醛）保存犬肝中氯丙嗪濃度第7d時(shí)分別上升至最初濃度的237.01％、160.75％、165.52％、60.27％，保存320

13、d時(shí)，分別顯者下降至最初濃度的67.91％、78.60％、67.84％、12.63％。
　　 結(jié)論:
　　 1.本文建立了生物檢材中氯丙嗪的氣相色譜/質(zhì)譜和氣相色譜檢測(cè)方法，前者選擇性好，定性準(zhǔn)確，后者色譜簡(jiǎn)便，快速，敏捷，定量結(jié)果準(zhǔn)確，可用于氯丙嗪中毒的臨床快速檢驗(yàn)診斷和氯丙嗪中毒（死）案件的法醫(yī)學(xué)鑒定。
　　 2.氯丙嗪死后分布不均勻，6LD50灌胃染毒大鼠體內(nèi)氯丙嗪含量順序?yàn)椋何?、肝、肺、腦、脾、腎、心、心

14、血。8LD50灌胃染毒家兔體內(nèi)氯丙嗪含量順序?yàn)槲?、肝、肺、腦、脾、腎、心、心血。臟器組織中氯丙嗪濃度均高于血液。在氯丙嗪中毒（死）案件的法醫(yī)學(xué)鑒定中，除采集血液和胃外，還可選取脾﹑肝、肺、腎﹑腦等組織為檢材，其死后分布規(guī)律為氯丙嗪中毒（死）案件的法醫(yī)學(xué)鑒定中檢材采取和特殊案件血中藥物濃度推斷提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 3.氯丙嗪在染毒犬體內(nèi)可發(fā)生死后再分布，1/2LD50氯丙嗪在灌胃致死犬死后與死亡當(dāng)時(shí)心血氯丙嗪濃度比（C 死后/C

15、0h）達(dá)0.47～2.28，死后與死亡當(dāng)時(shí)肝臟氯丙嗪濃度比（C 死后/C0h）達(dá)1.57～6.74，肌肉中含量變化不大。提示氯丙嗪在染毒致死犬體內(nèi)存在死后時(shí)間依賴(lài)的血與臟器濃度變化，可發(fā)生死后再分布，肌肉組織受影響較小。因此，氯丙嗪意外死亡案件或多藥濫用死亡法醫(yī)學(xué)鑒定中，不僅要取心血，而且盡量采集肌肉、腦等受死后再分布影響較小的檢材，在相關(guān)的死因分析上考慮死后尸檢時(shí)間，取材部位、尸體存放環(huán)境等因素，進(jìn)行綜合分析。
　　 4.氯丙

16、嗪在家兔體內(nèi)可發(fā)生死后彌散，LD50氯丙嗪灌胃染毒3h后，大腦、心、肝、脾、肺、腎、左、右后肢肌和心血中均檢出氯丙嗪成份，且脾中氯丙嗪含量最高。尿和膽汁中在6d后仍未檢出氯丙嗪成份。在鹽酸氯丙嗪中毒（死）法醫(yī)學(xué)鑒定中可根據(jù)尿液和膽汁中是否檢測(cè)出氯丙嗪來(lái)區(qū)分生前服毒和死后染毒。
　　 5. 氯丙嗪在染毒犬保存肝臟和心血中均可發(fā)生降解；保存溫度降低或添加1％氟化鈉能使其分解半衰期和檢出期限延長(zhǎng)，而4％的甲醛溶液（20℃）固定則能能使