GnRH、LHR和PRL基因多態(tài)性及其與荷斯坦牛精液品質(zhì)的關聯(lián)研究.pdf

1、根據(jù)精子發(fā)生的生殖內(nèi)分泌調(diào)節(jié)機制和影響精液品質(zhì)的調(diào)控機理,選擇參與精子發(fā)生的生殖激素基因及其受體以及與生殖有關的基因作為候選基因,研究這些基因多態(tài)性及其與種公牛精液品質(zhì)的關聯(lián)性,并對部分有豐富多態(tài)性的基因在生產(chǎn)中進行驗證,旨在尋找與精液品質(zhì)相關的標記基因,為建立種公牛分子標記輔助選擇新方法提供理論依據(jù)。
　　 本研究以GnRH、LHR和PRL作為候選基因,采用PCR-RFLP、PCR-SSCP和測序等方法,分析了候選基因在四個荷

2、斯坦種公牛群體共計209個樣本中的多態(tài)性及其與荷斯坦種公牛精液平均采精量、精子密度、原精活力、凍精活力、頂體完整率和畸形率等性狀的關系,結果發(fā)現(xiàn):
　　 1.GnRH基因外顯子2發(fā)生A883G突變,引起HinfⅠ酶切位點多態(tài)性,在四個來源的荷斯坦種公牛群體均檢測到AA、AB和BB三種基因型,A等位基因頻率在抽樣群體中占優(yōu)勢地位。性狀關聯(lián)分析發(fā)現(xiàn),AB型個體原精活力顯著高于BB型個體(P<0.05),推測GnRH基因外顯子2 Hi

3、nfⅠ酶切位點AB雜合型為優(yōu)勢基因型,A等位基因可能與原精活力性狀呈正相關。
　　 2.LHR基因內(nèi)含子9發(fā)生A51703G突變,引起B(yǎng)faⅠ酶切位點多態(tài)性,在四個來源的荷斯坦種公牛群體均檢測到AA、AB和BB三種基因型,變化趨勢為AB型>AA型>BB型,A等位基因頻率在抽樣群體中占優(yōu)勢地位。性狀關聯(lián)分析發(fā)現(xiàn),AB型個體原精活力顯著高于AA型個體(P<0.05),推測LHR基因BfaⅠ酶切位點AB雜合型為優(yōu)勢基因型。
　　

4、 3.LHR基因內(nèi)含子9發(fā)生G51656T突變,引起HinfⅠ酶切位點多態(tài)性,在三個來源的荷斯坦種公牛群體均檢測到AA、AB和BB三種基因型,而在鄭州群體中缺失AA基因型,其變化趨勢為BB型>AB型>AA型,B等位基因頻率在抽樣群體中占優(yōu)勢地位。性狀關聯(lián)分析發(fā)現(xiàn),BB型個體的精子密度顯著高于AA型個體(P<0.05)、原精活力性狀顯著高于AB型個體(P<0.05)、項體完整率性狀顯著高于AA型個體,推測LMR基因HinfⅠ酶切位點BB

5、型為優(yōu)勢基因型。
　　 4.PRL基因外顯子4發(fā)生G7550A突變,引起RsaⅠ酶切位點多態(tài)性,來源于天津和鄭州的2個荷斯坦種公牛群缺失BB基因型,四個群體中AA基因型頻率高于AB基因型頻率,BB基因型頻率最低,A等位基因頻率在抽樣群體中占優(yōu)勢地位。性狀關聯(lián)分析發(fā)現(xiàn),不同基因型個體種公牛之間差異不顯著(P>0.05),推測PRL基因該突變位點可能與荷斯坦種公牛的精液品質(zhì)性狀無關。
　　 5.PRL基因內(nèi)含子4發(fā)生C766

6、1T突變,引起AIuⅠ酶切位點多態(tài)性,來源于上海和鄭州的2個荷斯坦種公牛群缺失BB基因型,四個群體中AA基因型頻率高于AB基因型頻率,BB基因型頻率最低,A等位基因頻率在抽樣群體中占優(yōu)勢地位。性狀關聯(lián)分析發(fā)現(xiàn),不同基因型個體種公牛之間差異不顯著(P>0.05),推測PRL基因該突變位點可能與荷斯坦種公牛的精液品質(zhì)性狀無關。
　　 6.PRL基因外顯子5發(fā)生T8370C突變,引起AciⅠ酶切多態(tài)性,四個荷斯坦種公牛群均檢測到AA、