種鵝生殖道TLRs家族基因的表達(dá)及鵝舍通風(fēng)降溫對反季節(jié)繁殖種蛋受精率的影響.pdf

1、種鵝生殖道TLRs家族基因的表達(dá)及鵝舍通風(fēng)降溫對反季節(jié)繁殖種蛋受精率的影響由兩個(gè)實(shí)驗(yàn)部分組成。本試驗(yàn)第一部分研究了LPS誘導(dǎo)的鵝生殖道非特異性免疫反應(yīng)，對培育抗細(xì)菌病鵝新品系、尋找治療靶基因以及提高種鵝生產(chǎn)性能具有重要意義。實(shí)驗(yàn)選取揚(yáng)州鵝種鵝30只，根據(jù)注射LPS劑量的不同分為對照組和試驗(yàn)組共6組。對照組注射1 mL生理鹽水，試驗(yàn)組2、4、6、8、10組依次注射濃度為2、4、6、8、10 mg/mL的LPS溶液;注射后3h采生殖道樣品，

2、提取總RNA反轉(zhuǎn)錄后，通過RT-PCR分析TLRs家族基因的相對表達(dá)量水平。試驗(yàn)由三小部分組成，[第一部分]研究了TLRs家族基因在生殖道的表達(dá)定位，僅TLR1A在膨大部不表達(dá)和TLR5在子宮部不表達(dá)，傘部、峽部和陰道部表達(dá)全部的TLRs家族基因。[第二部分]研究生殖道各部位TLRs家族基因的相對表達(dá)量水平差異，TLR1A在輸卵管陰道部表達(dá)量水平顯著高于傘部(P＜0.05)，與峽部、子宮部差異不顯著(P＞0.05)。TLR1B傘部表達(dá)量

3、水平顯著高于峽部、膨大部、子宮部和陰道部(P＜0.05)。TLR2A在傘部、膨大部的表達(dá)量水平顯著高于峽部、子宮部和陰道部(P＜0.05)。TLR2B在輸卵管各段表達(dá)量水平差異皆不顯著(P＞0.05)。TLR3在陰道部表達(dá)量水平顯著高于傘部、峽部和膨大部(P＜0.05)，與子宮部差異不顯著(P＞0.05)。TLR4在峽部表達(dá)量水平最高，與傘部、膨大部差異不顯著(P＞0.05)，顯著高于子宮部和陰道部(P＜0.05)。TLR5在峽部、陰道

4、部表達(dá)量水平顯著高于傘部和膨大部(P＜0.05)，子宮部可能不表達(dá)。TLR7在子宮部表達(dá)量水平最高，顯著高于傘部、峽部、膨大部和陰道部(P＜0.05)。TLR15在陰道部表達(dá)量水平最高，顯著高于子宮部(P＜0.05)，與傘部、峽部和膨大部差異不顯著(P＞0.05); TLR21在輸卵管各部表達(dá)量水平差異不顯著(P＞0.05)。[第三部分]研究了注射不同劑量的LPS對生殖道各部分TLR2A、TLR2B和TLR4表達(dá)量水平的影響。注射梯度濃

5、度LPS溶液3h后，傘部TLR2A和TLR2B表達(dá)量水平均出現(xiàn)上調(diào)，TLR2B隨LPS濃度變化出現(xiàn)表達(dá)量水平峰值。峽部TLR4表達(dá)量水平在LPS為6 mg/mL時(shí)有峰值;TLR2A表達(dá)量水平上調(diào)。膨大部TLR2A和TLR4表達(dá)量水平上調(diào)，TLR4表達(dá)量水平在LPS劑量為8 mg/mL時(shí)出現(xiàn)峰值，顯著高于其他各組（P＜0.05）; TLR2B表達(dá)量水平各組間差異不顯著(P＞0.05)。子宮部TLR2A、TLR2B和TLR4表達(dá)量水平上調(diào)，

6、TLR2A和TLR4在LPS劑量為4 mg/mL時(shí)出現(xiàn)峰值，顯著高于對照組和其他試驗(yàn)組(P＜0.05)，TLR2B在LPS劑量為6 mg/mL時(shí)出現(xiàn)峰值; TLR2B表達(dá)量水平各組間差異不顯著(P＞0.05)。陰道部TLR2A和TLR2B表達(dá)量水平上調(diào)，TLR4表達(dá)量水平各組間差異不顯著(P＞0.05)。[結(jié)論]種鵝生殖道存在識別病原微生物的10種TLRs家族基因，各部分間存在表達(dá)量水平差異;傘部、峽部、膨大部、子宮部和陰道部對于相同的

7、病原微生物識別能力存在差異;TLR2A、TLR2B和TLR4為LPS的識別受體，靜脈注射LPS，會導(dǎo)致三種基因表達(dá)量水平上調(diào)，啟動生殖道非特異性免疫反應(yīng)。
　　本試驗(yàn)第二部分是根據(jù)第一部分的研究，探討在蘇南地區(qū)推廣夏季反季節(jié)養(yǎng)鵝的合理設(shè)施。實(shí)驗(yàn)選取常州反季節(jié)繁殖相同構(gòu)造種鵝舍兩棟，飼養(yǎng)規(guī)模（種鵝數(shù)）、飼養(yǎng)密度(2.3/m2)和公母比(1∶5)相同。利用自動化數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)、空氣采樣器和粉塵儀，對比負(fù)壓濕簾降溫鵝舍（A舍）和單純負(fù)壓通

8、風(fēng)鵝舍（B舍）內(nèi)的溫濕度、細(xì)菌氣溶膠濃度、單位體積粉塵含量、種鵝繁殖性能。試驗(yàn)證明采用負(fù)壓濕簾降溫可以有效降低舍內(nèi)溫度，夏季高溫時(shí)段，A舍氣溫低于B舍3℃以上，低于外界6℃以上;相同采樣點(diǎn)，進(jìn)風(fēng)口處A舍細(xì)菌氣溶膠濃度與B舍差異不顯著(P＞0.05)，其他三點(diǎn)，A舍總細(xì)菌含量、大腸桿菌含量和金黃色葡萄球菌含量均顯著或極顯著低于B舍（P＜0.05或P＜0.01）;六次孵化數(shù)據(jù)顯示，第三、第四批次種蛋受精率A舍顯著高于B舍，第三、第六批次受精