藕節(jié)對高糖環(huán)境下足細(xì)胞的保護(hù)作用及機制研究.pdf

1、目的：
　　觀察藕節(jié)含藥血清對高糖環(huán)境下足細(xì)胞增殖的影響，以及對足細(xì)胞上nephrin和podocin蛋白表達(dá)的作用，從而探討藕節(jié)對足細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用的機制。
　　方法：
　　足細(xì)胞株，37℃培養(yǎng)箱中，用無γ-IFN的10％FBS RPMI培養(yǎng)液培養(yǎng)14天后足細(xì)胞分化成熟，隨機分為7組，（1）正常糖組（NG：5.5 mmol/LGlu），（2）高糖組（HG：30 mmol/LGlu），（3）高滲組（MA：NG+24.5

2、 mmol/L甘露醇），（4）藕節(jié)低劑量組（RL：HG+藕節(jié)1.5 g/Kg/d含藥血清），（5）藕節(jié)中劑量組（RM：HG+藕節(jié)3.0 g/Kg/d含藥血清），（6）藕節(jié)高劑量組（RH：HG+藕節(jié)6.0 g/Kg/d含藥血清），（7）貝那普利組（BP：HG+貝那普利含藥血清）。以上各組培養(yǎng)液均含10%大鼠血清。采用CCK-8法檢測各組足細(xì)胞在12 h、24 h、36 h、48 h的增殖情況；Western Blot檢測48 h后各組足細(xì)

3、胞上nephrin和podocin蛋白表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：
　　1.不同劑量藕節(jié)對高糖環(huán)境下足細(xì)胞增殖的影響：與NG組相比，HG組培養(yǎng)12 h時OD值無明顯差異，24 h時OD值降低，但無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），36 h時OD值降低有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），48 h時OD值明顯降低（P＜0.05），MA組在各時間點OD值與NG的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；提示高糖培養(yǎng)足細(xì)胞36 h時細(xì)胞增殖出現(xiàn)抑制，48

4、 h時同樣有抑制作用，且這種作用與葡萄糖所引起的高滲透壓無關(guān)。不同劑量藕節(jié)及貝那普利處理足細(xì)胞后，與HG組相比，36 h RH組OD值升高（P＜0.05），48 h RM、RH、BP組OD值均顯著增高（P＜0.05）；同期RM、RH組與BP組無統(tǒng)計學(xué)差異；提示中、高劑量藕節(jié)含藥血清可拮抗高糖環(huán)境對足細(xì)胞的抑制增殖作用，且最佳作用時間為48 h。
　　2.各組足細(xì)胞上nephrin和podocin蛋白的表達(dá)：與NG組相比，HG組足細(xì)

5、胞上nephrin和podocin蛋白表達(dá)明顯減少（P＜0.05），MA組二者表達(dá)基本無差異。與HG組比較，不同劑量藕節(jié)及貝那普利干預(yù)組nephrin和podocin蛋白表達(dá)均增加，其中RM組podocin蛋白表達(dá)較HG組明顯增加（P＜0.05），RH、BP組nephrin、podocin蛋白表達(dá)較HG組顯著增加（P＜0.05）；且RH組與BP組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)論：
　　1.高糖培養(yǎng)足細(xì)胞可顯著抑制足細(xì)胞的增殖，中