益腎膠囊對(duì)高糖環(huán)境下小鼠足細(xì)胞自噬的影響.pdf

1、目的：
　　觀(guān)察益腎膠囊含藥血清對(duì)高糖環(huán)境下小鼠腎小球足細(xì)胞自噬的影響。
　　方法：
　　分別以益腎膠囊0.625g/kg·d、1.25g/kg·d、2.5g/kg·d及貝那普利30mg/kg·d的劑量給予大鼠灌胃7天，經(jīng)腹主動(dòng)脈取血，離心、滅菌制備不同濃度的益腎膠囊含藥血清及貝那普利含藥血清，對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠腎小球足細(xì)胞進(jìn)行分組干預(yù)，細(xì)胞分為：正常組（NG）、高糖組（HG）、低濃度益腎膠囊含藥血清組（LY）、中濃度益

2、腎膠囊含藥血清組（MY）、高濃度益腎膠囊含藥血清組（HY）、貝那普利含藥血清組（BP）。Western Blot檢測(cè)自噬相關(guān)LC3Ⅱ蛋白與泛素結(jié)合蛋白p62（p62／SQSTMl）蛋白的表達(dá)變化。透射電鏡下觀(guān)察各組足細(xì)胞內(nèi)自噬體的變化。光學(xué)顯微鏡觀(guān)察各組足細(xì)胞形態(tài)。
　　結(jié)果：
　　1.Western Blot檢測(cè)結(jié)果：各細(xì)胞組LC3Ⅱ蛋白的表達(dá)：與NG相比，HG足細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ表達(dá)減少（p<0.05）；與HG相比

3、，各藥物干預(yù)組LC3Ⅱ蛋白表達(dá)水平均呈上升趨勢(shì)，其中HY、BP顯著升高（p<0.05）；而HY與BP相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。各細(xì)胞組p62蛋白的表達(dá)：與NG相比， HG足細(xì)胞p62蛋白表達(dá)增多（p<0.05）；與HG相比，各藥物干預(yù)組p62蛋白表達(dá)水平均呈下降趨勢(shì)，其中HY、BP顯著降低（p<0.05）；而HY與BP相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。
　　2.透射電鏡觀(guān)察各細(xì)胞組自噬體結(jié)果：與NG相比，HG細(xì)胞內(nèi)

4、自噬體數(shù)目明顯減少（p<0.05），與HG相比，各藥物干預(yù)組自噬體數(shù)目呈上升趨勢(shì)，其中HY、BP顯著升高（p<0.05）；而HY與BP相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。
　　3.光學(xué)顯微鏡觀(guān)察各組足細(xì)胞形態(tài)結(jié)果：NG足細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，從胞體延伸出許多突起。HG較NG有更多足細(xì)胞從培養(yǎng)皿底部脫落，貼壁細(xì)胞足突縮短。LY、MY、HY、BP與HG足細(xì)胞相比在形態(tài)上前者更接近NG；其中HY與BP細(xì)胞增殖更旺盛。
　　結(jié)論：