肺組織中水通道蛋白1和溺死的研究.pdf

1、目的:該研究的目的是尋找和建立一種準(zhǔn)確、科學(xué)和具有實用性的診斷溺死的方法,并用分子生物學(xué)的理論和技術(shù)對溺死的機(jī)制進(jìn)行研究.因為原有的方法存在以下的不足和問題:1、檢驗結(jié)果科學(xué)性不強(qiáng).不論是硅藻檢驗還是花粉檢驗方法,雖然從理論和實踐上都比較敏感和可行,但因空氣中存在花粉或硅藻,人體溺死前已受污染而出現(xiàn)假陽性,亦可因機(jī)體內(nèi)這類異物含量很低,或在檢測過程中極可能遭破壞,以至于檢測不出,造成假陰性.2、目前對于溺死的形成機(jī)制不清楚,存在爭議,值

2、得進(jìn)一步深入研究.3、在研究方法上與其它醫(yī)學(xué)學(xué)科相比有一定的差距,大部分還在重復(fù)使用一些較老的化學(xué)和物理方法,創(chuàng)新不多,特別是運用分子生物學(xué)方面的成果于溺死的研究方面還很少.4、目前對于實驗室檢驗結(jié)果和溺死機(jī)制存在爭論,在法醫(yī)學(xué)實踐中主要是依據(jù)大體尸體征象進(jìn)行綜合分析后鑒定為是否溺死,這種鑒定方法不夠精確和仔細(xì),科學(xué)性較差,容易出現(xiàn)差錯.方法:該課題分為動物實驗和法醫(yī)臨床實踐初步運用兩部分.實驗動物采用SD健康大鼠(四川大學(xué)華西醫(yī)學(xué)實驗

3、動物中心提供),實驗分成溺死組、對照Ⅰ組和對照Ⅱ組,采用擲硬幣方法將實驗動物隨機(jī)分入溺死組、對照Ⅰ組和對照Ⅱ組,溺死組動物沉沒于常溫下的家用自來水中溺死,對照Ⅰ組和對照Ⅱ組均用股動脈放血法處死,處死后對照Ⅰ組按溺死組一樣置入家用自來水中,對照Ⅱ組不與水接觸,分別記錄時間后取材.采用免疫組化、透射電鏡、免疫電鏡及RT-PCR方法對各組肺組織中水通道蛋白1的表達(dá)進(jìn)行研究.免疫組化結(jié)果在圖像分析系統(tǒng)下對表達(dá)陽性部位進(jìn)行分析,數(shù)據(jù)以x±S表示,

4、所有數(shù)據(jù)均經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,用統(tǒng)計SPSS軟件進(jìn)行方差分析和q檢驗.免疫電鏡結(jié)果采用膠體金顆粒計數(shù),進(jìn)行半定量分析,用統(tǒng)計SPSS軟件進(jìn)行方差分析和t檢驗.RT-PCR方法在圖像分析系統(tǒng)下對瓊脂糖電泳分離后的凝膠成像進(jìn)行識別分析,數(shù)據(jù)以x±S表示,用統(tǒng)計SPSS軟件進(jìn)行方差分析和q檢驗.在法醫(yī)實際案件中評價AQP-1的作用.結(jié)論:該課題通過對大鼠溺死模型的AQP-1研究證實:1、AQP-1定位在肺組織的Ⅰ型上皮細(xì)胞膜、支氣管上皮細(xì)胞和血管內(nèi)