水通道蛋白在內(nèi)毒素性急性肺損傷小鼠肺組織的表達(dá)及可能調(diào)節(jié)機(jī)制.pdf

1、目的：研究脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)所致小鼠急性肺損傷(acute lung injury，ALO)時(shí)肺組織水通道蛋白(aquaporin，AQP)1、3、5的表達(dá)，地塞米松(dexameathone，DXM)對急性肺損傷的作用及對AQP1、3、5的影響，并觀察ALI肺組織環(huán)磷酸腺苷(cycliadenosine monphosphate，cAMP)含量變化，探討水通道蛋白在ALI時(shí)可能的調(diào)節(jié)機(jī)制。

2、方法：脂多糖(LPS)4mg·kg-1氣管內(nèi)滴入誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷。在滴入前10分鐘和滴入后3小時(shí)尾靜脈注射地塞米松(DXM，0.5mg·kg-1)。LPS誘導(dǎo)后6小時(shí)檢測正常對照組、LPS組和地塞米松組小鼠肺濕/干重比(wet/dryweightratio，W/D)、肺滲透指數(shù)(pulmonary permeability index，PPI)、支氣管肺泡灌注液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中自

3、細(xì)胞和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，BALF中腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor—α，TNF—α)、白介素(interleukin，IL)-1β，觀察光學(xué)顯微鏡下肺病理損傷的程度；采用半定量RT-PCR方法測定肺組織AQP1、3、5的mRNA表達(dá)水平，采用ELISA方法測定各組小鼠肺組織cAMP含量。 結(jié)果： 1．LPS組的肺組織濕/干(W/D)比(4.67±0.37)與對照組(4.07±0.30)比較升高(P＜

4、0.01)，與LPS組相比DXM組(4.13±0.31)下降(P＜0.01)；LPS組的PPI(8.82±1.48)較正常組(4.61±0.78)升高(P＜0.01)，與LPS組相比DXM組(5.46±1.25)抑制PPI的上升(P＜0.01)。DXM明顯抑制LPS的誘導(dǎo)的肺水腫。 2．LPS組BALF中白細(xì)胞和中性粒細(xì)胞上升，DXM組抑制LPS誘導(dǎo)的白細(xì)胞數(shù)(P＜0.01)。 3．LPS組BALF中TNF—α高于對照組

5、(P＜0.05)，而DXM抑制TNF—α上升(P＜0.01)；LPS組BALF中IL-1β水平升高(P＜0.05)，DXM組IL-1β下降(P＜0.01)。 4．對照組肺組織蘇木精—伊紅染色(hematoxyli and eosin，HE)染色，肺泡結(jié)構(gòu)完整，肺泡壁無水腫，肺實(shí)質(zhì)無明顯炎癥細(xì)胞浸潤，LPS組肺泡壁水腫增厚，肺間質(zhì)中性粒細(xì)胞浸潤，有出血水腫。而DXM組肺部炎癥明顯減輕。LPS組肺損傷病理評分4.8±0.4比對照組0

6、.2+0.1增高(P＜0.01)，DXM組評分為1.9±0.3與LPS組有差異(P＜0.05)。 5、LPS組AQP1與AQP5的mRNA表達(dá)下降(P＜0.01)，DXM組AQP1與AQP5的mRNA表達(dá)增加，而AQP3表達(dá)3組間無差異(P＞0.05)。 6、LPS組肺組織環(huán)磷酸腺苷(cycli adenosine monphosphate，cAMP)的含量下降(P＜0.05)，DXM組cAMP的含量增加(P＜0.05)

7、。 結(jié)論： 1．LPS可誘導(dǎo)小鼠發(fā)生ALI，預(yù)先尾靜脈給予DXM對LPS誘導(dǎo)的小鼠ALI有保護(hù)作用。 2．AQP1、AQP5的表達(dá)減少與ALI肺泡毛細(xì)血管間水轉(zhuǎn)運(yùn)失衡，肺泡肺間質(zhì)液體積聚相關(guān)，DXM可能通過上調(diào)AQP1、AQP5表達(dá)，減輕ALI時(shí)的肺水腫。 3．ALI時(shí)cAMP的含量下降，AQP1，AQP5的表達(dá)減少；尾靜脈給予DXM，提高了肺組織cAMP的含量增加，并增強(qiáng)AQP1與AQP5表達(dá)，提示cA