水通道蛋白-5在機(jī)械通氣相關(guān)性肺損傷大鼠肺組織中的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、目的：建立呼吸機(jī)相關(guān)性肺損傷(VILI)大鼠動(dòng)物模型，研究不同潮氣量機(jī)械通氣對(duì)肺組織損傷的影響。
　　 方法： SPF級(jí)雄性SD大鼠60只，體重200～250g，實(shí)驗(yàn)前12h禁食，自由飲水。10％水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉后，頸部正中切開(kāi)置入氣管導(dǎo)管，據(jù)潮氣量(VT)不同隨機(jī)分成三組(n=20)：正常對(duì)照組(A組)氣管切開(kāi)自主呼吸4h;除對(duì)照組外均接小動(dòng)物呼吸機(jī)，小潮氣量組（B組）VT7ml/kg，RR40次/min，

2、通氣4h;大潮氣量組（C組）VT40ml/kg，RR40次/min，通氣4h。4h后腹主動(dòng)脈放血處死動(dòng)物，鉗夾左側(cè)主支氣管，收集左側(cè)肺組織，稱(chēng)濕重后置烤箱80℃干燥至48h恒重，測(cè)定肺濕/干重(W/D)。經(jīng)氣管灌入4％多聚甲醛固定右側(cè)肺組織，行HE染色觀察肺組織病理學(xué)變化。結(jié)果(1)對(duì)照組肺組織無(wú)明顯病理學(xué)變化，小潮氣量組大鼠肺組織大體標(biāo)本表面無(wú)出血點(diǎn)，光學(xué)顯微鏡下肺泡壁完整、稍增厚，肺泡腔無(wú)出血、充血，無(wú)明顯炎細(xì)胞浸潤(rùn)；大潮氣量組肺組

3、織表面充血及出血明顯，光鏡下肺組織失去正常的結(jié)構(gòu)，肺泡過(guò)度擴(kuò)張，肺泡壁及肺泡腔內(nèi)大量出血及炎細(xì)胞浸潤(rùn)。(2)與A組比較，B組W/D值無(wú)明顯變化，C組W/D值升高(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與B組比較，C組W/D值升高(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論大潮氣量機(jī)械通氣導(dǎo)致大鼠肺組織嚴(yán)重?fù)p傷，肺組織水腫明顯，通過(guò)肺組織病理學(xué)變化及肺組織濕/干重測(cè)定表明本實(shí)驗(yàn)設(shè)定大潮氣量機(jī)械通氣可建立呼吸機(jī)相關(guān)肺損傷大鼠動(dòng)物模型(VILI)

4、。
　　 目的探討不同潮氣量對(duì)機(jī)械通氣相關(guān)性肺損傷大鼠肺組織AQP5的基因及蛋白表達(dá)的影響。
　　 方法： SPF級(jí)雄性SD大鼠60只，體重200～250g，實(shí)驗(yàn)前12h禁食，自由飲水。10％水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉后，頸部正中切開(kāi)置入氣管導(dǎo)管，據(jù)潮氣量(VT)不同隨機(jī)分成三組(n=20)：正常對(duì)照組(A組)氣管切開(kāi)自主呼吸4h;除對(duì)照組外均接小動(dòng)物呼吸機(jī)，小潮氣量組（B組）VT7ml/kg，RR40次/mi

5、n，通氣4h;大潮氣量組（C組）VT40ml/kg，RR40次/min，通氣4h。4h后腹主動(dòng)脈放血處死動(dòng)物，立即剖胸，取大鼠肺組織保存。采用免疫組化、RT-PCR、Westernblot法測(cè)定肺組織中AQP5的基因及蛋白表達(dá)，同時(shí)進(jìn)行肺組織病理學(xué)評(píng)分。結(jié)果(1)與A組比較，B組AQP5表達(dá)無(wú)明顯改變，C組AQP5表達(dá)降低(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與B組比較，C組AQP5表達(dá)降低(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；(2)C