我國(guó)貝類中赤潮毒素腹瀉性貝毒免疫檢測(cè)技術(shù)研究.pdf

1、分類號(hào)UDC密級(jí)單位代碼一坦上過(guò)一一一我國(guó)貝類中赤潮毒素腹瀉性貝毒免疫檢測(cè)技術(shù)研究劉仁沿指導(dǎo)教師馬德毅職稱研究員學(xué)位授予單位大連海事大學(xué)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別工學(xué)博士學(xué)科與專業(yè)環(huán)境科學(xué)論文完成日期2008年4月論文答辯日期加08年7月答辯委員會(huì)主席創(chuàng)新點(diǎn)摘要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)摘要1、制備了對(duì)腹瀉性貝毒素主要成份軟海綿酸具有很強(qiáng)特異性的單克隆抗體。利用碳二亞胺縮合技術(shù)方法，以血藍(lán)蛋白作為偶聯(lián)載體蛋白，成功的合成了具有高免疫性的軟海綿酸一血藍(lán)蛋白偶合物，通過(guò)免疫

2、BalbC鼠，利用細(xì)胞融合技術(shù)，制備了優(yōu)良的抗腹瀉性貝毒主要成份軟海綿酸的單克隆抗體，為建立貝類中軟海綿酸的酶聯(lián)免疫和免疫層析檢測(cè)技術(shù)奠定了基礎(chǔ)。2、建立了貝類中軟海綿酸的酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)。使用制備的高抑制率的抗OA一KLH多克隆抗體和單克隆抗體，利用合成偶聯(lián)的軟海綿酸一卵清蛋白作為包被抗原，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗鼠抗體作為酶標(biāo)二抗，首次在國(guó)內(nèi)建立了貝類中腹瀉性貝毒主要成份軟海綿酸的間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)，方法的靈敏度達(dá)到國(guó)際領(lǐng)先水

3、平。3、建立了貝類中軟海綿酸的膠體金標(biāo)記免疫層析檢測(cè)技術(shù)。制備了軟海綿酸的膠體金標(biāo)記免疫層析快速檢測(cè)卡。利用合成偶聯(lián)的軟海綿酸一卵清蛋白作為包被抗原，用膠體金標(biāo)記制備純化的高抑制率的抗OA一KLH單克隆抗體，首次建立了膠體金免疫層析快速檢測(cè)軟海綿酸技術(shù)方法，并可滿足食品安全聞值檢出限要求。4、本研究建立的酶聯(lián)免疫吸附分析和膠體金標(biāo)記免疫層析檢測(cè)貝類中軟海綿酸的方法可以滿足規(guī)定的20抖g1009貝肉的安全閩值，可應(yīng)用于貝類實(shí)際樣品的分析，