腹瀉性貝毒軟海錦酸快速免疫檢測技術研究.pdf

1、腹瀉性貝毒（Diarrlletic shellfish Poisoning,DSP）是由有毒赤潮藻鰭藻屬和原甲藻屬產生的一類脂溶性多環(huán)醚類生物活性物質，主要成分是軟海綿酸(Okadaic Acid,OA)及其衍生物。腹瀉性貝毒可在貝類等濾食性動物體內富集，因而危害食用者健康。近年來關于腹瀉性貝毒的事件在我國均有報道。腹瀉性貝毒的主要檢測分析方法有生物毒性法、液相色譜法以及免疫化學法。本研究采用碳二亞胺方法合成了軟海綿酸與蛋白載體的偶聯(lián)物

2、，分別用作免疫抗原和包被抗原。通過免疫Balb/c小鼠，利用細胞融合技術，制備了抗軟海綿酸的單克隆抗體,建立了軟海綿酸的間接競爭酶聯(lián)免疫檢測技術和膠體金標記免疫層析檢測技術。結果表明：用抗OA單克隆抗體建立的間接競爭酶聯(lián)免疫檢測方法，最低檢出限為0.45ng/ml，靈敏度為2.59ng/ml，平均回收率為92.04％，平均變異系數(shù)為3.52％。用抗OA單克隆抗體建立的膠體金標記免疫層析快速檢測方法，檢測時間為3-5min，檢出限為25n