局部應(yīng)用的辣椒堿納米脂質(zhì)載體的制備、表征及其體內(nèi)外評(píng)價(jià).pdf

1、目的:本研究擬構(gòu)建辣椒堿納米脂質(zhì)載體局部給藥系統(tǒng)，通過單因素分析以及Box-Becken設(shè)計(jì)優(yōu)化處方，以期提高辣椒堿的透皮量，能夠產(chǎn)生鎮(zhèn)痛、抗炎作用，同時(shí)減少辣椒堿局部應(yīng)用的皮膚刺激性。
　　方法:
　　1.通過單因素分析篩選影響辣椒堿納米脂質(zhì)載體包封率和粒徑的處方因素;
　　2.利用Box-Becken設(shè)計(jì)分析不同處方因素對(duì)響應(yīng)值的影響，模擬得到優(yōu)化處方，對(duì)合成的辣椒堿納米脂質(zhì)載體進(jìn)行物理化學(xué)性質(zhì)表征并考察體外釋放情

2、況;
　　3.通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，考察辣椒堿游離藥物和辣椒堿納米脂質(zhì)載體對(duì)皮膚細(xì)胞的毒性;
　　4.通過體外經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)，考察辣椒堿制劑的透皮效果和不同皮層內(nèi)辣椒堿的滯留量;考察納米脂質(zhì)載體促進(jìn)藥物透皮的深度和主要途徑;
　　5.采用熱板法考察辣椒堿制劑對(duì)ICR小鼠的鎮(zhèn)痛作用;采用角叉菜膠大鼠足趾腫脹模型考察辣椒堿制劑的抗炎作用，并探究其抗炎機(jī)制;
　　6.考察不同濃度辣椒堿制劑的皮膚刺激性;
　　7.通過篩

3、選適宜凍干保護(hù)劑，制備辣椒堿納米脂質(zhì)載體凍干粉劑。
　　結(jié)果:利用Box-Becken設(shè)計(jì)優(yōu)化處方，考察固液脂質(zhì)比例、脂質(zhì)投入量和表面活性劑使用量對(duì)包封率和粒徑的綜合影響，得到最優(yōu)處方為:脂質(zhì)總質(zhì)量為0.86g，其中固體脂質(zhì)占58％;表面活性劑用量為3.6％。制備得到的辣椒堿納米脂質(zhì)載體溶液呈乳白色且?guī)в腥楣猓骄?，約為119nm，形態(tài)圓整，包封率為91.6％且在體外釋放48h過程中具有良好的緩釋效果。MTT實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)

4、證明納米脂質(zhì)載體能夠降低辣椒堿對(duì)皮膚細(xì)胞的毒性，增加使用的安全性。體外24 h經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)后，辣椒堿納米脂質(zhì)載體及其凝膠的單位面積累積透過量分別為29.7μg.cm-2和25.6μg.cm-2，較辣椒堿市售軟膏組和辣椒堿溶液組的17.9μg.cm-2和2.2μg.cm-2顯著提高;辣椒堿納米脂質(zhì)載體及其凝膠的透皮速率較辣椒堿溶液組分別提高14.4倍和12.2倍，表明納米脂質(zhì)載體能夠顯著提高辣椒堿的透皮效率。通過檢測辣椒堿的皮內(nèi)滯留量證明

5、納米脂質(zhì)載體能夠顯著增加辣椒堿在表皮和真皮中的滯留。利用細(xì)胞膜綠色熒光探針(3，3'-dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate，Dio)代替辣椒堿進(jìn)行藥物透皮深度和主要透皮途徑的考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Dio溶液組大約滲透至150μm皮膚深度，而Dio納米脂質(zhì)載體凝膠組和Dio納米脂質(zhì)載體組可滲透至皮膚內(nèi)約210μm和260μm，結(jié)合皮膚切片觀察結(jié)果表明納米脂質(zhì)載體主要是通過毛囊附屬器途徑促進(jìn)藥物透皮，增加藥物

6、的透皮深度。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明辣椒堿納米脂質(zhì)載體具有鎮(zhèn)痛作用且呈劑量依賴性并可以通過抑制PGE2信號(hào)通路產(chǎn)生抗炎作用。皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示納米脂質(zhì)載體能夠減輕辣椒堿的刺激性。利用篩選得到的凍干保護(hù)劑:2％蔗糖+2％葡萄糖制備辣椒堿納米脂質(zhì)載體凍干粉劑，發(fā)現(xiàn)其具有較好的復(fù)溶性且復(fù)溶后納米粒形態(tài)并未發(fā)生明顯變化。
　　結(jié)論:經(jīng)Box-Becken設(shè)計(jì)優(yōu)化處方后制備得到的辣椒堿納米脂質(zhì)載體溶液及其凝膠具有良好的體外透皮效果，能夠在體內(nèi)產(chǎn)