胡椒科植物大葉蒟鎮(zhèn)痛、抗抑郁、抗焦慮和毒性研究.pdf

1、大葉蒟(Piper laetispicum C.DC)屬胡椒科胡椒屬植物,為我國(guó)傣民族藥,民間稱小腸風(fēng),山胡椒,野胡椒,傣語(yǔ)稱其干燥莖藤為“嘿沙干”,在西雙版納民間用于治療心胃氣痛、腹痛、腹瀉、嘔吐和消化不良等癥,用時(shí)將莖藤切碎嚼服或用涼水沖服立止。本品同屬多種植物的莖藤在東南亞國(guó)家民間廣為藥用。
　　 在本課題組前期的藥效篩選過程中,發(fā)現(xiàn)大葉蒟具有潛在的鎮(zhèn)痛和抗抑郁的活性?；诒菊n題組的前期研究結(jié)果和大葉藥在民間的藥用價(jià)值,本

2、文詳細(xì)探討大葉藥鎮(zhèn)痛,抗抑郁,抗焦慮活性及可能的作用機(jī)制;同時(shí)對(duì)大葉蒟的毒性也做了初步研究。
　　 藥理活性和作用機(jī)制的研究主要采用經(jīng)典的動(dòng)物行為學(xué)模型。
　　 鎮(zhèn)痛抗炎活性的研究采用醋酸扭體法、福爾馬林致痛法、熱板法、縮尾法和二甲苯致炎法,對(duì)揮發(fā)油、醇提取物、各個(gè)不同極性萃取部位以及大葉蒟素和芝麻素的鎮(zhèn)痛活性進(jìn)行評(píng)定。運(yùn)用納洛酮拮抗的方法測(cè)定阿片受體是否參與大葉蒟的鎮(zhèn)痛作用。
　　 結(jié)果:
　　 1.大

3、葉蒟不同營(yíng)養(yǎng)器官的揮發(fā)油具有鎮(zhèn)痛作用,其鎮(zhèn)痛作用的強(qiáng)弱與揮發(fā)油中所含的倍半萜的含量呈正相關(guān)性,主要作用部位為外周鎮(zhèn)痛。
　　 2.大葉藥的95％乙醇提取物有鎮(zhèn)痛活性,其鎮(zhèn)痛作用部位為外周和中樞,但是外周作用明顯強(qiáng)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的鎮(zhèn)痛。
　　 3.在大葉蒟各個(gè)萃取相中,石油醚相和氯仿相均有鎮(zhèn)痛作用,但是乙酸乙酯相的鎮(zhèn)痛作用不明顯;然而在抗炎方面,石油醚相,氯仿相,乙酸乙酯相均有顯著活性。
　　 4.大葉蒟素和芝麻素

4、均有很好的鎮(zhèn)痛效果。大葉藥素具有很好的中樞鎮(zhèn)痛作用,該鎮(zhèn)痛作用不受阿片受體拮抗劑納洛酮的拮抗,說明阿片受體并不參與大葉蒟素的中樞鎮(zhèn)痛作用;而芝麻素的作用部位主要為外周鎮(zhèn)痛。
　　 結(jié)論:
　　 1.在大葉蒟的揮發(fā)油中,倍半萜類化合物是大葉蒟鎮(zhèn)痛作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。在去除揮發(fā)油的提取物中,酰胺類生物堿和木脂素類化合物是主要的活性成分,而且倍半萜類化合物和酰胺類生物堿或木脂素類化合物可能有協(xié)同鎮(zhèn)痛作用。
　　 2.粗

5、提物,各萃取部位都顯示了較強(qiáng)的外周鎮(zhèn)痛抗炎作用。
　　 3.大葉蒟素和芝麻素是有機(jī)相中兩個(gè)主要單體化合物。大葉蒟素具有明顯的中樞鎮(zhèn)痛作用,阿片受體并不參與大葉藥素的鎮(zhèn)痛機(jī)制。芝麻素的外周鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)于中樞鎮(zhèn)痛。
　　 抗抑郁活性的研究采用小鼠強(qiáng)迫游泳法和小鼠懸尾法,對(duì)大葉藥95％乙醇提取物,各個(gè)萃取相,大葉藥素和大葉蒟素衍生物的抗抑郁活性進(jìn)行評(píng)定,并用納洛酮,精氨酸和PCPA驗(yàn)證阿片受體、NO通路和5-HT系統(tǒng)是否參與大葉

6、蒟素抗抑郁作用。
　　 結(jié)果:
　　 1.大葉蒟95％乙醇提取物120,240和480mg/kg在急性給藥和亞長(zhǎng)期給藥的情況下都顯示很好的抗抑郁活性。
　　 2.各個(gè)萃取相的抗抑郁結(jié)果顯示:石油醚部位,氯仿部位,乙酸乙酯部位都有抗抑郁活性,相比較而言,石油醚部位和氯仿部位的抗抑郁活性明顯強(qiáng)于乙酸乙酯部位;在三個(gè)有效部位的作用機(jī)制研究過程中,只有氯仿部位的抗抑郁機(jī)制與五羥色胺系統(tǒng)有關(guān)。
　　 3.大葉蒟素的

7、抗抑郁活性在小鼠強(qiáng)迫游泳和小鼠懸尾試驗(yàn)中都呈明顯的線性量效關(guān)系,機(jī)制研究顯示阿片受體,和五羥色胺系統(tǒng)不參與大葉蒟素的抗抑郁作用,但一氧化氮通路至少部分參與大葉蒟素的抗抑郁作用。
　　 4.運(yùn)用小鼠強(qiáng)迫游泳對(duì)16個(gè)大葉蒟素衍生物的抗抑郁活性進(jìn)行初篩,急性給藥結(jié)果顯示ysy-5,ysy-7,ysy-10,ysy-11,ysy-12,ysy-16具顯著抗抑郁活性;七天給藥結(jié)果顯示ysy-5,ysy-7,ysy-10和ysy-16顯示了

8、抗抑郁活性。
　　 結(jié)論:
　　 1.大葉蒟乙醇提取物具有抗抑郁作用,且亞長(zhǎng)期給藥后,動(dòng)物不出現(xiàn)耐藥性。
　　 2.五羥色胺系統(tǒng)不參與石油醚部位和乙酸乙酯部位的抗抑郁作用,而部分參與氯仿部位的抗抑郁作用。
　　 3.五羥色胺系統(tǒng),阿片受體不參與大葉藥素的抗抑郁作用;一氧化氮通路至少部分參與大葉蒟素的抗抑郁作用。
　　 4.大葉蒟素的衍生物中,ysy-5,ysy-7,ysy-10,ysy-16具有較

9、好的抗抑郁活性,提示我們大葉蒟衍生物中的構(gòu)效關(guān)系。
　　 5.各個(gè)萃取部位,大葉蒟素,大葉藥素衍生物的作用機(jī)制還需進(jìn)一步研究。
　　 抗焦慮作用的研究采用經(jīng)典的明暗箱選擇試驗(yàn)、高架迷宮試驗(yàn)和孔板實(shí)驗(yàn)。小鼠自主行為的評(píng)價(jià)運(yùn)用開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。對(duì)乙酸乙酯部位和大葉蒟素的抗焦慮活性進(jìn)行評(píng)定,并運(yùn)用苯二氮卓類受體拮抗劑氟馬西尼對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了研究。
　　 結(jié)果:
　　 1.大葉藥乙酸乙酯部位和大葉蒟素均有抗焦慮作用。<

10、br>　　 2.乙酸乙酯部位用240mg/kg給藥時(shí)出現(xiàn)較為明顯的抗焦慮作用。
　　 3.在給定的劑量范圍內(nèi),大葉蒟素抗焦慮作用的有效劑量是10mg/kg,5mg/kg和20mg/kg在所使用的三個(gè)動(dòng)物模型中均沒有顯示顯著性差異。
　　 4.苯二氮卓類受體拮抗劑氟馬西尼不逆轉(zhuǎn)乙酸乙酯部位和大葉蒟素的抗焦慮作用。
　　 結(jié)論:
　　 1.乙酸乙酯部位的抗焦慮作用較弱,只有240mg/kg顯示較為明顯的抗焦

11、慮作用。
　　 2.在給定的劑量范圍內(nèi),與空白組相比,大葉蒟素的量效關(guān)系曲線呈鐘形,而不是典型的線性量效關(guān)系,其抗焦慮作用的有效劑量是10mg/kg,5mg/kg和20mg/kg沒有出現(xiàn)顯著性差異。
　　 3.苯二氮卓類受體不參與乙酸乙酯部位和大葉蒟素的抗焦慮作用。
　　 對(duì)以上三種藥理活性評(píng)價(jià)時(shí)均采用開場(chǎng)試驗(yàn)對(duì)小鼠自主活動(dòng)行為進(jìn)行評(píng)定,以排除由于藥物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用引起的假陽(yáng)性結(jié)果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:在三種藥理活

12、性的研究中,所有的有效劑量都不引起小鼠自主活動(dòng)行為的改變,說明各個(gè)有效的給藥劑量引起的動(dòng)物行為變化是特異性行為變化。
　　 在發(fā)現(xiàn)大葉蒟具有顯著藥理活性的同時(shí),我們對(duì)大葉蒟的毒性作用也進(jìn)行了初步研究。我們對(duì)大葉蒟乙酸乙酯部位的急性毒性和長(zhǎng)期毒性進(jìn)行了研究。對(duì)于長(zhǎng)期給藥之后的動(dòng)物自主行為和認(rèn)知進(jìn)行評(píng)定,對(duì)可能的毒性器官進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　 結(jié)果:
　　 1.大葉蒟乙酸乙酯部位的LD50是1530mg/kg(灌胃給藥)和

13、538mg/kg(腹腔注射給藥)。
　　 2.長(zhǎng)期毒性研究過程中,各給藥組小鼠的體重沒有明顯變化,沒有明顯異常行為,而500mg/kg組小鼠的肝臟重量顯著增加。
　　 3.經(jīng)過90天給藥,小鼠的自主行為和記憶能力沒有受到顯著影響。
　　 結(jié)論:
　　 1.乙酸乙酯部位的毒性較小。
　　 2.在長(zhǎng)期給藥情況下,肝臟是可能的毒性靶向器官。
　　 3.長(zhǎng)期給藥不影響自主行為和記憶能力。