從基因的差異性表達(dá)上探討IBS-D內(nèi)臟高敏性形成機(jī)制以及痛瀉要方緩解IBS-D內(nèi)臟高敏的機(jī)制.pdf

1、目的：
　　1、探討腸易激綜合征(irritable bowel syndrome IBS)內(nèi)臟高敏性動(dòng)物模型的建模方法，以及成模后模型穩(wěn)定性的觀察，為進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)的造模方法提供依據(jù)。
　　2、建立大鼠內(nèi)臟高敏感性模型,檢測(cè)各組大鼠海馬組織以及腸管組織的基因表達(dá)情況，以探討可能介導(dǎo)IBS-D內(nèi)臟高敏性的通路機(jī)制。
　　3、從基因的表達(dá)差異上研究痛瀉要方緩解IBS-D內(nèi)臟高敏性的機(jī)制
　　方法：
　　1、用大小

2、不等的血管成形術(shù)球囊對(duì)幼鼠與成年大鼠結(jié)直腸擴(kuò)張，在停止刺激后
　　2周、4周、6周檢測(cè)大鼠痛閾值，判斷造模模型是否成功并且評(píng)價(jià)兩種造模方法的穩(wěn)定性
　　2、以出生第8天的SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，實(shí)驗(yàn)組在出生后8-21天每天接受血管成形術(shù)球囊擴(kuò)張，對(duì)照組大鼠被溫柔抓起，腹摸其會(huì)陰部1分鐘，大鼠在完成上述刺激后，不再給與任何刺激，飼養(yǎng)至第5周，評(píng)價(jià)大鼠的內(nèi)臟敏感性，繼續(xù)喂養(yǎng)并做好標(biāo)記，痛瀉要方組持續(xù)灌胃中藥4周，此后再次檢測(cè)大鼠的內(nèi)

3、臟敏感性，劇結(jié)果判斷痛瀉要方是否有效，停藥后繼續(xù)普通喂養(yǎng)1周后取大鼠血清、海馬、腸管組織樣本，利用基因芯片技術(shù)分析各組腦腸中的基因表達(dá)情況，利用免疫組化技術(shù)檢測(cè)蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果與結(jié)論：
　　1、用幼鼠分別在出生后8-21天每天接受均使用血管成形術(shù)球囊擴(kuò)張（壓力60mmHg）所造的模型與用成年大鼠同樣方法所造的模型對(duì)比，前者所建立的動(dòng)物模型更穩(wěn)定，在一定程度上說(shuō)明以新生鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象所建立的動(dòng)物模型更符合腸易激綜合征慢

4、性疾病的特征。
　　2、模型組海馬組織的c-fos基因的表達(dá)量明顯高于空白對(duì)照組海馬組織c-fo基因的表達(dá)量(p<0.05)，痛瀉要方組海馬組織的c-fo基因的表達(dá)量明顯低于模型組海馬組織c-fos基因的表達(dá)量(p<0.05)。
　　3、模型組腸管組織組織IL1r1基因表達(dá)量明顯高于空白對(duì)照組腸管組織組織IL1r1基因表達(dá)量(p<0.05)，模型組腸管組織組織IL1r1基因表達(dá)量明顯低于痛瀉要方組腸管組織組織IL1r1基因表