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文檔簡介
1、目的:腸易激綜合征(Irritable Bowel Syndrome,IBS)是以慢性內(nèi)臟痛和胃腸功能紊亂為主要特征的功能性疾病,但其內(nèi)臟痛發(fā)生的具體機制還不清楚。越來越多的數(shù)據(jù)資料表明孕期的應(yīng)激事件可能會對子代產(chǎn)生長期的影響,從而導(dǎo)致胚胎源性疾病。本研究探討孕期應(yīng)激(Prenatal Maternal Stress, PMS)是否能導(dǎo)致子代成年雄性大鼠結(jié)腸痛覺過敏及其潛在的分子神經(jīng)機制。
方法:1.把懷孕的雌性Sprague
2、-Dawley(SD)大鼠分成實驗(PMS)組和對照(CON)組。PMS大鼠從懷孕第6天開始每天經(jīng)歷異源型間隙性應(yīng)激(Heterotypical Intermittent Stress, HIS),直至第22天。2.子代出生后,挑選雄性個體,待其6周后進行結(jié)直腸擴張(Colorectal Distention, CRD)行為學(xué)實驗。運用熒光素(DiI)逆行標(biāo)記結(jié)腸相關(guān)脊髓背根神經(jīng)節(jié)(Dorsal Root Ganglion, DRG),
3、全細胞膜片鉗方法研究大鼠結(jié)腸相關(guān)DRG興奮性的變化。3.腹腔注射胱硫醚-β-合成酶(Cystathionineβ-synthase, CBS)拮抗劑AOAA,運用western blotting方法觀察子代雄性大鼠DRG T13-L2中CBS和辣椒素受體(Transient Receptor Potential Vanilloid1, TRPV1)蛋白表達變化,用分光光度計法分析子代雄性大鼠血漿中硫化氫(Hydren Sulfide,
4、H2S)濃度的變化。
結(jié)果:1.孕期應(yīng)激誘發(fā)6-10周子代雄性大鼠CRD內(nèi)臟收縮反應(yīng)增加,表現(xiàn)為EMG振幅增加。6周子代雄性大鼠的靜息膜電位去極化增加,基強度減小,動作電位個數(shù)增加,說明結(jié)腸相關(guān)DRG興奮性增加。2.PMS組子代雄性大鼠腹腔注射AOAA后,翻轉(zhuǎn)大鼠內(nèi)臟高敏,并呈劑量效應(yīng)關(guān)系。連續(xù)7天腹腔注射AOAA10mg/kg能顯著降低 PMS組子代大鼠的興奮性。3.孕期應(yīng)激誘發(fā)6、8、10周子代大鼠結(jié)腸相關(guān) DRG中CBS
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