在大腸桿菌內(nèi)引入MVA途徑高效合成抗瘧藥青蒿素前體——紫穗槐-4,11-二烯.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、以青蒿素為基礎(chǔ)的聯(lián)合藥物療法(ACTs)被認(rèn)為是目前治療惡性瘧疾的最有效方法。然而青蒿素供應(yīng)不足且價格昂貴,限制了ACTs的廣泛使用。本研究旨在采用基因工程手段構(gòu)建異源類異戊二烯生物合成途徑,利用大腸桿菌發(fā)酵高效合成抗瘧藥青蒿素前體--紫穗槐-4,11-二烯。首先在Escherichia coli DHGT7中引入人工合成的紫穗槐-4,11-二烯合酶基因,利用大腸桿菌內(nèi)源的法尼基焦磷酸(FPP),成功獲得了紫穗槐-4,11-二烯。為提高

2、前體供給,引入糞腸球菌(Enterococcus faecalis)的甲羥戊酸(MVA)途徑,紫穗槐-4,11-二烯產(chǎn)量提高了13.3倍,達(dá)到151 mg/L。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)了3個限速酶,分別是紫穗槐-4,11-二烯合酶、HMG-COA還原酶和甲羥戊酸激酶；通過調(diào)節(jié)這些酶的水平,紫穗槐-4,11-二烯產(chǎn)量提高了7.2倍,搖瓶培養(yǎng)達(dá)到235 mg/L,為高效生物合成抗瘧藥青蒿素前體--紫穗槐-4,11-二烯奠定了基礎(chǔ)。
　　 另外

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