生物胺在對蝦酚氧化酶原系統(tǒng)激活過程中作用機(jī)制的研究.pdf

1、本文研究了生物胺(biogenic amine，BA)在對蝦酚氧化酶原系統(tǒng)激活過程中的作用機(jī)制。主要探討了①3種生物胺對凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei血細(xì)胞數(shù)量和酚氧化酶原胞吐的影響；②多巴胺(dopamine，DA)對凡納濱對蝦血細(xì)胞作用途徑的初步研究；③注射多巴胺、病原菌(Vibrio alginolyticus)對凡納濱對蝦血淋巴生物胺含量和酚氧化酶原系統(tǒng)的影響；④注射多巴胺、病原菌對凡納濱對蝦免疫力的影響。主

2、要結(jié)果如下： 1.3種生物胺對凡納濱對蝦血細(xì)胞數(shù)量和酚氧化酶原胞吐的影響 多巴胺、去甲腎上腺素(norepinephrine，NE)和5-羥色胺(serotonin，5-HT)對凡納濱對蝦三類血細(xì)胞、總血細(xì)胞數(shù)量、血細(xì)胞酚氧化酶原活力和血細(xì)胞釋放的酚氧化酶活力影響顯著(P<0.05)，且具有時間劑量效應(yīng)。0.5、1.0和3.0μM的3種生物胺作用20min均會引起對蝦三類血細(xì)胞數(shù)量、總血細(xì)胞數(shù)量和血細(xì)胞酚氧化酶原活力顯著

3、降低，血細(xì)胞釋放的酚氧化酶活力顯著升高。相同濃度作用相同時間時，三種生物胺對上述指標(biāo)的影響從大到小依次為多巴胺、去甲腎上腺素和5-羥色胺。對照組上述各指標(biāo)在實驗時間內(nèi)均無明顯變化。 2.多巴胺對凡納濱對蝦血細(xì)胞作用途徑的初步研究 1μM多巴胺作用20min后，三類血細(xì)胞數(shù)量、總血細(xì)胞數(shù)量和血細(xì)胞酚氧化酶原活力顯著降低，血細(xì)胞釋放的酚氧化酶活力顯著升高(P<0.05)。在多巴胺作用前用10、100和500μM D1類多巴胺

4、受體拮抗劑劑SCH23390和D2類多巴胺受體拮抗劑劑舒必利單獨或混合孵育20min可顯著抑制(但并未完全抑制)多巴胺對三類血細(xì)胞數(shù)量、總血細(xì)胞數(shù)量、血細(xì)胞酚氧化酶原活力和血細(xì)胞釋放的酚氧化酶活力的影響(P<0.05)。 兩種受體拮抗劑對上述各指標(biāo)的作用具有劑量效應(yīng)，隨作用濃度的增大，抑制效果更加明顯；相同濃度的SCH23390比舒必利抑制作用更強(qiáng)；兩種受體拮抗劑混合作用比單獨使用一種效果顯著。 3.注射多巴胺、病原菌對

5、凡納濱對蝦血淋巴生物胺含量和酚氧化酶原系統(tǒng)的影響 注射50μl10-6 mol1-1、10-7 mol1-1多巴胺或6.0×105 cells ml-1、6.0×106 cellsml-1溶藻弧菌對凡納濱對蝦血淋巴中3種生物胺含量、三類血細(xì)胞和總血細(xì)胞數(shù)量、血細(xì)胞絲氨酸蛋白酶和酚氧化酶原活力、血淋巴酚氧化酶和蛋白酶抑制劑活力影響顯著(P<0.05)，且具有時間劑量效應(yīng)。除多巴胺處理組的絲氨酸蛋白酶活力外，其余各指標(biāo)均呈峰值變化，

6、但是達(dá)到峰值和趨于穩(wěn)定的時間具有不同步性。 注射多巴胺、病原菌后凡納濱對蝦血淋巴中5-羥色胺含量變化趨勢相似，分別在1h、6h和3h前顯著升高，而多巴胺含量變化趨勢相反，分別在3h達(dá)到最高和最低值，注射多巴胺組去甲腎上腺素含量3h前顯著升高，而注射病原菌組則在1h時達(dá)到最大值，之后顯著下降。注射多巴胺或6.0×106 cells ml-1溶藻弧菌的凡納濱對蝦總血細(xì)胞數(shù)量均顯著降低，而6.0×105 cells ml-1溶藻弧菌處

7、理組三類血細(xì)胞和總血細(xì)胞數(shù)量在3h前顯著升高，之后緩慢下降，6h后趨于穩(wěn)定；大顆粒細(xì)胞比例在3h前略有升高；除多巴胺處理組的絲氨酸蛋白酶活力外，其余酶活各指標(biāo)分別在1-6h內(nèi)達(dá)到最高或最低值。穩(wěn)定后，除病原菌處理組的5-羥色胺含量，多巴胺和6.0×106病原菌處理組透明細(xì)胞、小顆粒細(xì)胞和總血細(xì)胞數(shù)量，多巴胺處理組絲氨酸蛋白酶活力明顯低于對照組外，其余各指標(biāo)與對照組差異不顯著。對照組上述各指標(biāo)在實驗時間內(nèi)無顯著變化。 4.注射多巴

8、胺、病原菌對凡納濱對蝦免疫力的影響 注射10-6 mol1-1、10-7 mol1-1多巴胺或6.0×105 cells ml-1、6.0×106 cells ml-1溶藻弧菌對凡納濱對蝦血淋巴中3種生物胺含量、總血細(xì)胞數(shù)量、血細(xì)胞吞噬活力、血漿酚氧化酶活力、溶菌活力和血藍(lán)蛋白含量影響顯著。生物胺含量和總血細(xì)胞數(shù)量結(jié)果與3.中相同。 注射多巴胺或病原菌后，血細(xì)胞吞噬活力分別于6h和3h達(dá)到最小和最大值，并分別與注射劑量成

9、負(fù)相關(guān)和正相關(guān)；注射多巴胺或6.0×106 cells ml-1溶藻弧菌后溶菌活力于3h達(dá)到最小值，6h后趨于穩(wěn)定，而6.0×105 cells ml-1溶藻弧菌處理組溶菌活力于3h前顯著升高；多巴胺和病原菌處理組酚氧化酶活力分別于6h和1h升到最高，12h、3h后趨于穩(wěn)定。注射多巴胺或病原菌后血藍(lán)蛋白含量分別于6h和3h達(dá)到最大和最小值，24h后保持穩(wěn)定。 穩(wěn)定后除多巴胺和6.0×106 cells ml-1病原菌處理組溶菌活