Carmal在T細(xì)胞受體引起NF-κB激活過程中作用和機制研究.pdf

1、基因敲除實驗證明新型的蛋白激酶C家族成員PKCθ是TCR-CD28共刺激引起的NF-κB轉(zhuǎn)錄因子活化信號傳導(dǎo)通路上必不可少的成分,但PKCθ是如何引起IKK激活的過程并不清楚.該文介紹我們使用體細(xì)胞突變(somaticmutagensis)的方法,克隆了一株人T白血病細(xì)胞Jurkat的突變細(xì)胞株JPM50.6.與Jurkat野生型不同,JPM50.6特異性地缺失表達(dá)細(xì)胞膜相關(guān)聯(lián)的鳥苷激酶蛋白家族(membrane associated

2、guanylate kinase,MAGUK)成員Carma1.在該論文的第二部分,我們的研究證明Carma1與細(xì)胞膜是組成性的結(jié)合在一起.Carma1分子MAGUK結(jié)構(gòu)域中一個氨基酸的突變引起該分子與細(xì)胞膜相結(jié)合的功能的喪失,從而也失去了介導(dǎo)TCR引起的NF-κB活化的功能,說明這種與細(xì)胞膜結(jié)合的性能對Carma1的生理功能是非常重要的.盡管許多MAGUK家族成員參與神經(jīng)突觸的形成過程,Carma1的缺失并不影響T細(xì)胞免疫突觸的形成.

3、但是在Carma1缺失的JPM50.6突變細(xì)胞株中,TCR-CD28引起的信號傳導(dǎo)分子PKCθ,Bcl10,IKK向免疫突觸中的轉(zhuǎn)移完全消失,而Carma1于JPM50.6細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)則可逆轉(zhuǎn)這一缺失.說明這些重要信號傳導(dǎo)分子向免疫突觸中的轉(zhuǎn)移完全依賴于Carma1.與此相一致,進(jìn)一步的研究采用缺失Card域Carma1與Bcl10的融合分子能完全逆轉(zhuǎn)JPM50.6突變細(xì)胞株TCR-CD28共刺激引起的NF-κB活化的缺失.這些結(jié)果表