人外周血白細(xì)胞端粒DNA長度與年齡相關(guān)性的法醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究.pdf

1、目的:探討人外周血白細(xì)胞端粒DNA長度與年齡、性別的關(guān)系，及組織自溶對southem雜交法測量結(jié)果的影響，以評價通過人外周血白細(xì)胞端粒長度推斷個體年齡的法醫(yī)學(xué)應(yīng)用價值。 方法: 1.端粒-年齡相關(guān)性研究：收集97例健康人外周血，按年齡分為20-40歲組、41-60歲組和>61歲組。酚-氯仿法抽提人外周血白細(xì)胞基因組DNA，southern雜交方法測量端粒DNA限制性酶切片斷(TRF)長度。2.組織自溶對平均端粒長度測得值的影響：

2、另取6例同年齡(27歲)同性別(男性)人外周血各3ml，將同一血樣本平均分成3份(每份1ml)分別于收集后、人工氣候箱(25℃、50％)內(nèi)放置24h、放置72h提取人外周血白細(xì)胞DNA，上述方法測出經(jīng)不同時間自溶后人外周血白細(xì)胞端粒DNA限制性酶切片斷長度(TRF值)。 結(jié)果: 1.端粒-年齡相關(guān)性研究：不同年齡組測得的TRF值隨年齡增大依次遞減，通過SNK法檢驗不同年齡組間TRF值差異，結(jié)果顯示差異顯著(P<0.05)。對各年

3、齡組中不同性別的TRF值進(jìn)行t檢驗，發(fā)現(xiàn)除20-40歲組人外周血白細(xì)胞TRF值的性別差異不顯著外(P>0.05)，其余各組TRF值的性別差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。年齡與TRF值的相關(guān)線性關(guān)系良好(y=-0.054x+11.16 R2=0.64)。分別對不同性別組年齡與TRF值進(jìn)行線性分析發(fā)現(xiàn)，男性為y=-0.069x+11.67(R2=0.71)，女性為y=-0.39x+10.62(R2=0.69)。2.組織自溶對平均端粒長度

4、測得值的影響： SNK法對各自溶組間測得的TRF值進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)24h組與收集后組測得端粒長度差異不大(P>0.05)，72h組與即刻組和24h組都有顯著性差異(P<0.05)。 結(jié)論: 1.端粒-年齡相關(guān)性研究：端粒限制性酶切片斷長度隨個體年齡的增長而縮短，端粒長度的性別差異除20-40組外都有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義，且不同性別端粒的縮短速度不同，男性縮短速度快于女性。2.組織自溶對平均端粒長度測得值的影響：southem雜交法測得