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1、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文馴鹿β防御素1(reBD1)全長cDNA的克隆及序列分析姓名:郝永峰申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:楊銀鳳20060501TheCloningandSequenceAnalysisofthecDNAofReindeerBDefensinl(reBD11AbstractDefensinsareakindofpositiveantimicrobialpeptides,whichareallimporta
2、ntcomponentininnateimmunityoforganismandcontaincysteinerichanddistributeabroadinthekingdomsofanimalandplantAccordingtothedifferencesofthepositionandconnectmannerofcysteines,thepropertyofprecursors,thepositionofexpression
3、,defensinsaredevidedintofivesubfamilies:adefensin,Bdefensin,Odefensin,insectdefensinandplantdefensingdefensinsexpressextensivelyintheepithelialtissuesofmanyorgansinmammals,humanandavesInthisstudytotalRNAafterisolationfro
4、mtougueepitheliaofareindeerwasreversetranscribedtosynthesizethemiddleofreindeer13defensin(reBD一1)eDNAusingprimersdesignedbytakingconservedregionofruminant“sldefensineDNAsequencesThenWesynthesizesuccessfullythefulllengthc
5、DNAofreindeerBdefensin(reBD1、usingRACE(RapidAmplificationofcDNAEnds)372bpofthefull—lengtheDNAofreBD1containaORFof192bp,all5’untranslatedregion(5’UTR)of44bp,anYUTRof118bpandploy(A)15TheORFencodeanpreproreBD1of64aminoacidr
6、esidueswhichincludeasignalpeptideof20anlinoacidresidues,apropieceof6aminoacidresidues,amuturepeptideof38aminoacidresiduesThemuturepeptidewaspredictedthatcontain10positiveaminoacidresidues(6ArginineR,3Lysine—K1Histidine—H
7、)andnotfoundanynegativeaminoacidresiduesTherefore,thereBD1isapositivepepfideNucleotideandaminoacidsequencehomologyanalysisindicatedthatreBD1sharetllehigllesthomologywiththeB—defensinsofCOWsecondarywithcamelgoatandsheep,l
8、owerwithhumanandpigBothnucleotideandaminoacidsequencehomologyshowsthatcvolutionalaryrelationshipofreBD1isclosertotheBdefensiosofruminantthanhumanandpigKeywords:Reindeer:fldefensin:Clone:RTPCR:3RACE;5RACEDirectedby:ProfYA
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