氨氯地平對(duì)C57小鼠黑色素瘤B16抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用的研究.pdf

1、目的：探討鈣通路阻滯劑(calcium channel blocker,CCB)氨氯地平對(duì)C57小鼠黑色素瘤B16的抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用以及其相關(guān)機(jī)制的研究,為氨氯地平治療高轉(zhuǎn)移株的治療提供了相應(yīng)的理論基礎(chǔ)。
　　 方法：將B16細(xì)胞接種于C57小鼠右腹股溝皮下(2×106/只)將64只小鼠隨機(jī)分成對(duì)照組,以及三個(gè)劑量治療組。對(duì)照組從腫瘤種植第2天起灌胃給予生理鹽水0.2ml/只;治療組灌胃給予氨氯地平其劑量分別為1 mg/kg,3

2、mg/kg和10 mg/kg,每日1次,每次0.2ml,共21天,給藥期間觀(guān)察小鼠成瘤,進(jìn)食,及身體情況。于腫瘤種植第22天斷頸處死小鼠,觀(guān)察對(duì)照組和治療組的肺轉(zhuǎn)移情況,計(jì)數(shù)肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)以及各組的抑瘤率;體外進(jìn)行抑制血小板聚集實(shí)驗(yàn)研究;建立血小板免疫粘附小鼠黑色素細(xì)胞瘤B16細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?比較藥物作用前后粘附能力的差異;免疫組織化學(xué)檢測(cè)治療組和對(duì)照組腫瘤組織IL-8蛋白的表達(dá)水平;RT-PCR檢測(cè)各個(gè)實(shí)驗(yàn)組腫瘤組織的IL-8mRNA的表

3、達(dá)情況;Western Blot檢測(cè)各組腫瘤組織的ERK1/2,磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比氨氯地平可明顯抑制高轉(zhuǎn)移株黑色素瘤B16的增殖和自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移作用,并成劑量依賴(lài)性；體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比氨氯地平可顯著抑制小鼠黑色素瘤B16誘導(dǎo)的小鼠血小板聚集以及血小板與小鼠黑色素瘤B16細(xì)胞的粘附作用；免疫組織化學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比IL-8蛋白表達(dá)明顯減弱

4、(P＜0.05),隨著藥物劑量的增加IL-8蛋白表達(dá)逐漸減弱;PCR結(jié)果顯示,各個(gè)治療組的IL-8mRNA表達(dá)也明顯低于對(duì)照組(P＜0.05),且隨著藥物劑量增加IL-8mRNA的表達(dá)逐漸減弱；Westem Blot檢測(cè)結(jié)果表明治療組與對(duì)照組相比p-ERK1/2表達(dá)減弱,并且隨著藥物劑量增加p-ERK1/2表達(dá)成逐漸減弱趨勢(shì),而ERK1/2的表達(dá)各個(gè)組之間沒(méi)有顯著性差異。
　　 結(jié)論：氨氯地平可劑量依賴(lài)性的抑制小鼠黑色素瘤B16