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1、目的:1.建立兔前交叉韌帶重建術(shù)后腱-骨修復(fù)的動(dòng)物模型。2.評(píng)價(jià)可注射rhBMP-2納米控釋囊對(duì)肌腱-骨隧道界面修復(fù)效果,在組織學(xué)及生物力學(xué)方面評(píng)價(jià)可注射rhBMP-2納米控釋囊對(duì)肌腱-骨隧道界面修復(fù)的影響。3.為臨床治療前交叉韌帶損傷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:1.納入家兔46只,平均體重為(3.31±0.45)kg,經(jīng)兔耳緣靜脈注射施行全身麻醉。前交叉韌帶切除后取其對(duì)側(cè)跟腱重建,作為家兔前交叉韌帶重建術(shù)后腱-骨修復(fù)的動(dòng)物模型。2
2、.可注射rhBMP-2納米控釋囊對(duì)肌腱-骨隧道界面修復(fù)的影響:組織形態(tài)學(xué)及免疫組化的觀察。18只成年健康的家兔分為2組每組9只,取雙側(cè)膝關(guān)節(jié)共36膝。BMP-2組術(shù)中在肌腱-骨隧道界面注射rhBMP-2納米控釋囊;對(duì)照組術(shù)中不注射rhBMP-2。術(shù)后分批處死6只,隨機(jī)分為兩組各3只并切取標(biāo)本。對(duì)標(biāo)本切片染色處理后進(jìn)行組織學(xué)觀察。3.可注射rhBMP-2納米控釋囊對(duì)肌腱-骨隧道界面修復(fù)的影響:生物力學(xué)研究。24只家兔隨機(jī)分組分為2組,每組
3、12只,取雙側(cè)膝關(guān)節(jié),共48膝。BMP-2組術(shù)中在肌腱-骨隧道界面注射BMP-2;對(duì)照組術(shù)中不注射BMP-2。在術(shù)后第2、4、8周分批處死兩組,各4只,解剖并制備膝關(guān)節(jié)標(biāo)本置于深低溫冰箱保存,實(shí)驗(yàn)前常溫解凍,立即固定標(biāo)本,進(jìn)行生物力學(xué)測(cè)試即進(jìn)行相關(guān)拉伸試驗(yàn),記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)并進(jìn)行分析。
結(jié)果:可注射rhBMP-2納米控釋囊對(duì)肌腱-骨隧道界面修復(fù)的影響:組織形態(tài)學(xué)及免疫組化的觀察。手術(shù)后第2周兩組比較,BMP-2組抗體HE染色呈陽性
4、染色較深,染色均勻。對(duì)照組肌腱-骨隧道界面寬度均較寬,界面腱骨細(xì)胞生長(zhǎng)較少見,以炎性肉芽組織為主,分布不均勻。術(shù)后第4周對(duì)照組光鏡下可見成纖維細(xì)胞增生,炎性細(xì)胞明顯減少,肌腱-骨隧道界面腱性組織形成,BMP-2組肌腱-骨隧道界面間隙寬度減小,連接更致密,可見大量成纖維細(xì)胞。BMP-2組與對(duì)照組BMP-2抗體染色表達(dá)區(qū)域呈陽性,染色均較淺,BMP-2組染色更均勻有序。BMP-2組抗體染色表達(dá)呈陽性,染色較深,對(duì)照組染色較淺。術(shù)后第8周對(duì)照
5、組以結(jié)締組織為主。BMP-2組見肌腱-骨隧道界面成纖維細(xì)胞與對(duì)照組比較明顯增多,出現(xiàn)類似肌腱在骨骼止點(diǎn)結(jié)構(gòu)。可注射rhBMP-2納米控釋囊對(duì)肌腱-骨隧道界面修復(fù)的影響:生物力學(xué)的觀察。BMP-2組膝關(guān)節(jié)肌腱-骨隧道界面的最大抗拉強(qiáng)度在術(shù)后第2、4、8周均高于對(duì)照組。以對(duì)照組為基數(shù)術(shù)后BMP-2組肌腱-骨隧道界面的最大抗拉強(qiáng)度分別是116.19%、122.05%、148.67%。而在術(shù)后肌腱-骨隧道界面的最大抗拉強(qiáng)度方面,BMP-2組和對(duì)
6、照組在組間有顯著性差異(P<0.005)。以對(duì)照組為基數(shù)術(shù)后BMP-2組肌腱-骨隧道界面的剛度分別是對(duì)照組的111.73%、115.65%、150.59%。BMP-2組膝關(guān)節(jié)肌腱-骨隧道界面的剛度在術(shù)后第2、4、8周高于對(duì)照組。而術(shù)后BMP-2組與對(duì)照組組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.005)。
結(jié)論:1.納米控釋囊局部應(yīng)用家兔的膝關(guān)節(jié)模型可以作為研究BMP-2對(duì)肌腱-骨隧道界面修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究模型。2.BMP-2在早期有效促進(jìn)
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