牛磺酸對錳致原代培養(yǎng)海馬神經元毒性的干預作用研究.pdf

1、目的：應用新生大鼠海馬神經元體外原代培養(yǎng)的方法，探討錳致海馬神經元的神經毒性損害及?；撬岬母深A作用。 方法：取SPF級新生24小時內的Wistar大鼠大腦海馬作神經元原代培養(yǎng)，培養(yǎng)至最佳狀態(tài)，尼氏染色鑒定神經細胞后，用于實驗。將培養(yǎng)細胞分組為：①空白對照組；②單獨染錳組，設計為低、中、高三個劑量組，錳添加終濃度分別為0.2mM、0.8mM和1.2mM，分別記為MI、M2、M3；③?；撬釋φ战M，設計為低、中、高三個劑量組，?；撬崽?/p>

2、加劑量分別為5mM、10mM和20mM，分別記為TI、T2、T3；④?；撬岣深A組，錳及牛磺酸添加劑量按各自的低、中、高濃度分別進行組合，細分為九個濃度組。各處理組在施加處理因素后24小時終止培養(yǎng)，檢測以下指標：MTT比色試驗檢測神經元OD值，LDH實驗檢測神經元LDH活力，細胞凋亡-Hoechst染色觀察神經細胞凋亡染色質的形態(tài)學變化及半定量檢測凋亡率，FCM定量檢測細胞凋亡率，光鏡下觀察神經細胞的形態(tài)學改變，透射電鏡觀察神經細胞的超微