GSH敏感巰嘌呤-透明質(zhì)酸高分子前藥的制備與性能研究.pdf

1、兩親性高分子前藥能顯著改善藥物的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，提高生物利用度，降低毒副作用，并且可以自組裝形成前藥納米粒。研究表明，細(xì)胞內(nèi)液中含有較高濃度的谷胱甘肽（GSH，大約2-10 mmol·L-1），細(xì)胞外液中濃度僅有2-10μmol·L-1，而腫瘤細(xì)胞內(nèi)GSH濃度約為正常細(xì)胞中的4倍。因此，谷胱甘肽濃度差異可以作為藥物控釋因子應(yīng)用到前藥設(shè)計(jì)當(dāng)中。
　　為制備谷胱甘肽敏感的高分子前藥，本研究通過化學(xué)全合成制備了以二硫鍵為連接臂的透明質(zhì)酸-巰

2、嘌呤(6-MP-ss-HA)高分子前藥。這種谷胱甘肽敏感型高分子前藥在2-10μmol·L-1谷胱甘肽濃度下維持其結(jié)構(gòu)，而在2-10 mmol·L-1谷胱甘肽濃度下斷開二硫鍵釋放出藥物。并且，該兩親性高分子前藥能夠在磷酸鹽緩沖液（pH7.4）中自組裝形成谷胱甘肽敏感型納米粒。主要研究內(nèi)容和結(jié)論如下：
　　(1)以透明質(zhì)酸為載體，采用全化學(xué)合成法構(gòu)建谷胱甘肽敏感的透明質(zhì)酸-巰嘌呤高分子前藥，對目標(biāo)產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，并探討了物料投料

3、比、溫度和反應(yīng)介質(zhì)等條件對產(chǎn)率的影響。在30 ℃下以乙腈為反應(yīng)介質(zhì)，且?guī)€嘌呤(6-MP)與I2按摩爾比1：1投料時(shí)，巰嘌呤-ss-巰嘌呤(6-MP-ss-6-MP)的產(chǎn)率可達(dá)84.3％。反應(yīng)介質(zhì)pH值和物料投料比對高分子前藥載藥量均有一定影響，當(dāng)pH值為7.5，6-MP-ss-6-MP與HA-SH投料比為2:1（摩爾比）時(shí)，高分子前藥載藥量可達(dá)
　　10.8%。
　　(2)采用透析法研究了透明質(zhì)酸-巰嘌呤高分子前藥的體外釋藥

4、性能。分別模擬血液和細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中谷胱甘肽濃度，考察了谷胱甘肽濃度對高分子前藥釋藥性能的影響，同時(shí)考察了釋放介質(zhì)pH值，高分子前藥中巰嘌呤的含量這兩個(gè)因素對高分子前藥釋藥性能的影響。結(jié)果表明，透明質(zhì)酸-巰嘌呤在模擬血液中谷胱甘肽濃度條件下穩(wěn)定存在，而在模擬細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中谷胱甘肽濃度下快速釋藥，并隨谷胱甘肽濃度的提高，藥物的累積釋藥百分率隨之增大；該高分子前藥在pH5.6和pH7.4的釋放介質(zhì)中均可較快的釋放出巰嘌呤原藥，但在pH5.6下的最

5、高釋藥百分率略高于pH7.4下的最高釋藥百分率；三種不同載藥量的高分子前藥的釋藥曲線趨勢基本相同，且最高累積釋藥百分率相差不大。
　　(3)以透明質(zhì)酸-巰嘌呤高分子前藥為基材，采用超聲法構(gòu)建透明質(zhì)酸-巰嘌呤納米給藥系統(tǒng)，并對制備的納米粒進(jìn)行評價(jià)。采用穩(wěn)態(tài)熒光探針法測定三種不同載藥量的高分子前藥的臨界膠束濃度；采用動(dòng)態(tài)光散射法測定納米粒的粒徑及其分布；采用透射電鏡觀測納米粒的形態(tài)。不同載藥量的高分子前藥的臨界膠束濃度不同，隨著載藥量

6、的提高，高分子前藥的臨界膠束濃度逐漸降低；所制備的納米粒邊緣光滑，粒徑大小分布均勻，分散性良好，結(jié)構(gòu)緊致，呈現(xiàn)規(guī)則的球形。高分子前藥的載藥量對納米粒粒徑有顯著影響，隨著載藥量減小，粒徑逐漸增大。在37 ℃、pH7.4的PBS溶液中，6-MP-ss-HA納米粒在15d內(nèi)粒徑變化較小，因此在模擬人體血液環(huán)境中該載藥納米粒比較穩(wěn)定，但在模擬細(xì)胞內(nèi)環(huán)境谷胱甘肽條件下不穩(wěn)定。
　　以上研究結(jié)果表明，本文制備的兩親性透明質(zhì)酸-巰嘌呤高分子前藥