疏肝和胃湯治療肝郁脾虛證功能性消化不良有效部位的篩選.pdf

1、目的:
　　通過探討舒肝和胃湯不同部位的提取物對肝郁脾虛證功能性消化不良大鼠的體重、胃腸動力以及血清遞質(zhì)、胃竇蛋白的表達(dá)情況，篩選出疏肝和胃湯治療肝郁脾虛證功能性消化不良大鼠的較優(yōu)有效部位提取物。
　　方法:
　　提取出疏肝和胃湯水煎液的石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、余液部位。用夾尾刺激+飲食不規(guī)律+飲酸綜合法造肝郁脾虛證功能性消化不良動物模型;用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定治療后大鼠血清中的血清遞質(zhì)CCK

2、、GAS、MTL、AChE、SP、5-HT、ET-1、NO的含量;用蛋白印記法（Western Blot法）測定大鼠胃竇Ghrelin蛋白;用免疫組化法測定5-HT蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.疏肝和胃湯各提取部位對肝郁脾虛證功能性消化不良大鼠胃腸動力的影響。
　　胃內(nèi)殘存率:①正常對照組、正丁醇組、乙酸乙酯組、原液組、莫沙必利組和模型組、余液組比較(P＜0.01);正丁醇組和正常組比較(P＜0.05);②正丁醇組

3、、乙酸乙酯組、原液組和莫沙必利組比較(P＞0.05)。小腸推進(jìn)率:①正常對照組、正丁醇組、乙酸乙酯組、原液組、莫沙必利組和模型組、余液組比較(P＜0.01);②正丁醇組和正常組比較(P＜0.05);正丁醇組、乙酸乙酯組、原液組和莫沙必利組比較(P＞0.05)。
　　2.疏肝和胃湯正丁醇部位、乙酸乙酯部位對功能性消化不良大鼠的影響:
　　(1)體重:給藥結(jié)束后，(Ⅰ)組大鼠體重和Ⅵ組比較(P＜0.01)，(Ⅱ)和(Ⅵ)比較(P

4、＜0.01)，Ⅳ和Ⅵ比較(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(2)胃腸動力:與Ⅰ比較，Ⅵ組的胃內(nèi)殘存率較高(P＜0.05)。Ⅵ組小腸推進(jìn)率較低(P＜0.01)，與Ⅲ組比較(P＜0.05)，和本實驗中的其他組比較(P＞0.05)，均無顯著性差異;與Ⅵ組比較，Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組的胃內(nèi)殘存率明顯較低(P＜0.01)，Ⅲ組的胃內(nèi)殘存率也比Ⅰ組的低(P＜0.05)，Ⅱ組的小腸推進(jìn)率明顯比Ⅵ組的高(P＜0.05)，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的小腸推進(jìn)率和

5、Ⅵ組的比較均無顯著性差異;與Ⅱ比較，Ⅲ組的胃內(nèi)殘存率較高(P＜0.05)，小腸推進(jìn)率明顯要低(P＜0.05)，Ⅱ組和Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ組比較，胃內(nèi)殘存率和小腸推進(jìn)率均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　(3)血清遞質(zhì):CCK:正丁醇組與乙酸乙酯組、原液組，模型對照組比較有顯著性差異(P＜0.01)，正丁醇組與正常對照組和莫沙必利組比較均無顯著性差異。GAS:正常組和乙酸乙酯組有顯著性差異(P＜0.01)，正丁醇組與正常組和莫沙必利組比較均

6、無顯著性差異(P＞0.05)。MTL:莫沙必利組和正丁醇組比較(P＞0.05);乙酸乙酯組和正丁醇組比較(P＜0.01)。AChE:正丁醇組和莫沙必利組比較(P＞0.05)。原液組和正丁醇組比較(P＜0.05)。
　　(4)Ghrelin蛋白、5-HT蛋白的表達(dá):Ghrelin蛋白的表達(dá)，正丁醇組和莫沙必利組的條帶顏色最深，原液組的顏色次之，乙酸乙酯組和模型對照組的顏色均比正常組的淺。5-HT蛋白的表達(dá)，正常組、正丁醇組、莫沙必利

7、組表達(dá)率明顯高于模型對照組和乙酸乙酯組。
　　3.不同濃度疏肝和胃湯正丁醇部位提取物對肝郁脾虛證功能性消化不良的影響:
　　(1)體重:，正丁醇低濃度組(M3組)，模型對照組(M1組)和正常對照組(Z組)比較(P＜0.01)，有顯著性差異。正丁醇低濃度組(M3組)，模型對照組（M1組）和莫沙必利組（M2組）比較(P＜0.01)。莫沙必利組（M2組），正丁醇中濃度組(M4組)，正丁醇高濃度組(M5組)和正常對照組（Z組）比較(

8、P＞0.01)，沒有顯著性差異。
　　(2)胃腸動力:胃內(nèi)殘存率:莫沙必利組(M2組)與正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)比較((P＜0.05)，有顯著性差異;與正丁醇高濃度組(M5組)比較(P＞0.01)，沒有顯著性差異。正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)與正丁醇高濃度組(M5組)比較(P＞0.05)，頭顯著性差異。各組大鼠小腸推進(jìn)率比較:正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)與莫沙必

9、利組（M2組）比較(P＜0.05)，沒有顯著性差異，促進(jìn)小腸推進(jìn)效果比莫沙必利差;正丁醇高濃度組(M5組)與莫沙必利組（M2組）比較(P＜0.01)，有顯著性差異的，促進(jìn)小腸推進(jìn)的效果比莫沙必利好。正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)與正丁醇高濃度組(M5組)比較(P＜0.01)，有顯著性差異。正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)促進(jìn)小腸推進(jìn)的效果比正丁醇高濃度組(M5組)差。
　　(3)血清遞質(zhì):各組

10、大鼠血清遞質(zhì)SP、5-HT、ET-1、NO含量的比較:SP:M3，和M2組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，SP含量比M2少。M3，M4和M5比較(P＜0.01)，有顯著性差異，SP含量比M5組的少。5-HT:M3、M4和M2組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，5-HT的含量比莫沙必利組的少;M5組和M2組比較，有顯著差異性，5-HT的含量比莫沙必利組的多;M3，M4組和M5組比較(P＜0.05)，有顯著性差異，5-HT的含量比莫沙

11、必利組的多。ET-1:M1和Z組，M2、M3、M4、M5組比較均有顯著性差異(P＜0.01)。M2組和M3組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，M3組ET-1的含量低于M2組;M2組和M5組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，M5組ET-1的含量高于M2組;M3組、M4組和M5組比較(P＜0.05)，有顯著性差異，M5組ET-1的含量高于M3組，M4組。NO:M3組和M2組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，M3組NO的含量高于M2組的

12、含量。M5組和M2組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，M5組NO的含量明顯低于M2組的含量。
　　(4)胃竇Ghrelin蛋白表達(dá):胃竇Ghrelin蛋白的表達(dá)所示正常對照組（Z組）和莫沙必利組(M2)的條帶顏色灰度相似，M3、M4、M1組的顏色均比Z和M2的淺，M5的顏色最深。
　　結(jié)論：
　　(1)疏肝和胃湯的正丁醇部位，乙酸乙酯部位，原液可以增加肝郁脾虛證功能性消化不良大鼠的體重以及長推進(jìn)和胃排空作用，余液部位

13、幾乎沒有增加肝郁脾虛證功能性消化不良腸推進(jìn)胃排空的作用。而石油醚部位的幾乎沒有提取率，所以實驗排除疏肝和胃湯的石油醚和余液部位提取物，初步篩選出治療肝郁脾虛證功能性消化不良的正丁醇、乙酸乙酯部位提取物為后續(xù)研究做準(zhǔn)備。
　　(2)根據(jù)疏肝和胃湯有效部位提取物的初步篩選，研究正丁醇部位提取物、乙酸乙酯部位提取物以及原液對肝郁脾虛證功能性消化不良SD大鼠體重，胃腸動力，血清遞質(zhì)及蛋白的表達(dá)，篩選出正丁醇部位提取物為較優(yōu)的部位。