溫脾實(shí)腸法組方治療脾陽(yáng)不足型泄瀉機(jī)理的初步研究.pdf

1、脾陽(yáng)不足型泄瀉是消化科常見(jiàn)病之一,因泄瀉脾虛為本,而瀉久必及于陽(yáng)。輕則脾陽(yáng)虛損,重則損及腎陽(yáng)。江蘇省中醫(yī)院消化科劉沈林教授通過(guò)多年的臨床實(shí)踐,采用溫脾實(shí)腸法組方治療脾陽(yáng)不足型泄瀉,通過(guò)大量的臨床實(shí)踐證明該組方對(duì)脾陽(yáng)不足型泄瀉有效。為初步研究溫脾實(shí)腸法組方治療脾陽(yáng)不足泄瀉的治療機(jī)理,本實(shí)驗(yàn)將在第一部分從整體的角度觀察溫脾實(shí)腸法組方對(duì)胃腸道運(yùn)動(dòng)功能的調(diào)節(jié),在第二部分觀察溫脾實(shí)腸法組方的抗炎鎮(zhèn)痛作用,在第三、四、五部分從分子水平探討溫脾實(shí)腸法

2、組方治療脾陽(yáng)不足泄瀉的治療機(jī)理。
　　 第一部分溫脾實(shí)腸法組方對(duì)胃腸功能的影響
　　 第一節(jié)中采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽(yáng)不足泄瀉模型,造模后給予溫脾實(shí)腸法組方治療,觀察溫脾實(shí)腸法組方對(duì)脾陽(yáng)不足小鼠胃腸功能的影響。第二節(jié)中采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽(yáng)不足泄瀉模型,末次給藥后腹腔注射多巴胺,觀察溫脾實(shí)腸法組方對(duì)多巴胺抑制小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)功能的影響。第三節(jié)中采用100％大黃水煎

3、液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽(yáng)不足泄瀉模型,末次給藥后腹腔注射新斯的明,觀察溫脾實(shí)腸法組方對(duì)新斯的明促進(jìn)小鼠胃腸運(yùn)動(dòng)功能的影響。第四節(jié)中采用利血平皮下注射法復(fù)制大鼠脾陽(yáng)不足模型,觀察溫脾實(shí)腸法組方對(duì)利血平導(dǎo)致脾陽(yáng)不足大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)功能的作用。結(jié)果顯示:溫脾實(shí)腸法組方可提高大黃導(dǎo)致脾陽(yáng)不足泄瀉小鼠的胃殘留率、減少炭末推進(jìn)率,同時(shí)可增強(qiáng)多巴胺對(duì)脾陽(yáng)不足小鼠胃腸功能的抑制作用、抑制新斯的明對(duì)脾陽(yáng)不足小鼠胃腸功能的促進(jìn)作用。對(duì)利血平導(dǎo)致脾陽(yáng)不足大

4、鼠胃腸功能也有抑制作用,可提高脾陽(yáng)不足大鼠血清中NO濃度。
　　 第二部分溫脾實(shí)腸法組方的抗炎鎮(zhèn)痛作用
　　 本章中分別在第一節(jié)中觀察溫脾實(shí)腸法組方對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹及腹腔注入醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增強(qiáng)的影響,在第二節(jié)中觀察溫脾實(shí)腸法組方對(duì)熱刺激及化學(xué)刺激法致痛的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果顯示:溫脾實(shí)腸組方大劑量可抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹(與空白組比較p＜0.05),溫脾實(shí)腸法組方大、中、小劑量均可減輕醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)

5、血管通透性增強(qiáng),(與空白組比較差異顯著P＜0.01)。鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)表明溫脾實(shí)腸法組方小劑量組從120min起痛閾值與空白對(duì)照組比較具有顯著性差異(p＜0.05),中劑量組和大劑量組從90min起痛閾值與空白對(duì)照組比較具有顯著性差異(p＜0.05,P＜0.01),維持至180min。溫脾實(shí)腸法組方可明顯減少扭體次數(shù),與空白對(duì)照組比較具有顯著性差異(p＜0.05),其中溫脾實(shí)腸中劑量和大劑量組抑制率分別達(dá)66.0％和70.9％。
　　

6、第三部分溫脾實(shí)腸法組方對(duì)脾陽(yáng)不足型泄瀉模型大鼠消化酶活性的影響
　　 取SD大鼠,雌雄各半,采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法造成大鼠脾陽(yáng)不足泄瀉大鼠模型。造模結(jié)束后給予溫脾實(shí)腸法組方治療14天,末次給藥1h,眼眶靜脈叢取血,測(cè)定血清中淀粉酶、乳酸脫氫酶、琥珀酸脫氫酶水平。結(jié)果:脾陽(yáng)不足泄瀉模型組AMS及LDH水平明顯低于正常對(duì)照組(P＜0.01)。經(jīng)藥物治療后溫脾實(shí)腸方大、中、小劑量組均能明顯提高模型大鼠血清中AMS及

7、LDH水平(P＜0.01)。脾陽(yáng)不足模型大鼠血清中SDH水平明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.01),溫脾實(shí)腸法組方可降低模型大鼠血清中SDH水平(P＜0.01)。
　　 第四部分溫脾實(shí)腸法組方對(duì)脾陽(yáng)不足型泄瀉模型大鼠胃腸道激素的影響
　　 取SD大鼠,雌雄各半,采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法造成大鼠脾陽(yáng)不足泄瀉大鼠模型。造模結(jié)束后給予溫脾實(shí)腸法組方治療14天,末次給藥1h,末次給藥1h,取大鼠回腸組織,放免法檢測(cè)

8、回腸組織中胃泌素、胃動(dòng)素、生長(zhǎng)抑素水平。結(jié)果:脾陽(yáng)不足泄瀉大鼠回腸組織中GAS、MTL較正常對(duì)照組大鼠明顯降低(p＜0.05),回腸組織中SS含量雖有所下降但不具有顯著性差異。脾陽(yáng)不足泄瀉大鼠回腸組織中存在一定程度的胃腸激素分泌紊亂。經(jīng)溫脾實(shí)腸法組方治療后回腸組織中MAS、MTL、SS含量明顯升高(p＜0.05,P＜0.01)。
　　 第五部分溫脾實(shí)腸法組方對(duì)脾陽(yáng)不足型泄瀉模型大小鼠免疫系統(tǒng)及腸粘膜病理的影響。
　　 第

9、一節(jié)中采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽(yáng)不足泄瀉模型,造模結(jié)束后給予溫脾實(shí)腸法組方治療,末次給藥1h,眼眶靜脈叢取血,1％肝素抗凝,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠全血中CD4+、CD8+及CD4+/CD8+,取小鼠回腸組織,生理鹽水沖洗3次后置10％中性甲醛溶液中固定,石蠟包埋切片后,觀察溫脾實(shí)腸法組方對(duì)脾陽(yáng)不足型泄瀉小鼠腸粘膜結(jié)構(gòu)的影響。第二節(jié)采用4℃100％大黃水煎液灌胃加飲食失節(jié)法復(fù)制小鼠脾陽(yáng)不足泄瀉模型,造模結(jié)束后給

10、予溫脾實(shí)腸法組方治療,末次給藥1h,眼眶靜脈叢取血,采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清中sIgA含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:由第一節(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)模型對(duì)照組小鼠外周血中CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值均較正常組下降,溫脾實(shí)腸大劑量組和中劑量組外周血中CD4+比例較模型對(duì)照組外周血中CD4+比例升高,溫脾實(shí)腸大劑量組可明顯升高外周血中CD4+/CD8+比值,與模型對(duì)照組比較具有顯著性差異(P＜0.01)。鏡下所見(jiàn)各組動(dòng)物腸壁各層結(jié)構(gòu)清晰,粘

11、膜上皮形成絨毛突向腸腔,粘膜上皮含部分杯狀細(xì)胞,無(wú)變性壞死;粘膜內(nèi)腺體排列整齊,腺體完整,未見(jiàn)明顯破壞。由第二節(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)模型對(duì)照組血清中sIgA含量低于正常對(duì)照組,與正常對(duì)照組比較具有顯著性差異(P＜0.01),經(jīng)藥物治療后溫脾實(shí)腸大劑量、溫脾實(shí)腸中劑量及溫脾實(shí)腸小劑量均能提高血清中sIgA含量,與模型組比較具有顯著性差異(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:溫脾實(shí)腸法組方可抑制脾陽(yáng)不足泄瀉模型動(dòng)物胃腸運(yùn)動(dòng)功能,增強(qiáng)多巴胺對(duì)脾陽(yáng)不