益生菌發(fā)酵與活性保藏的基礎(chǔ)研究.pdf

1、抗生素的發(fā)現(xiàn)給人類的生產(chǎn)、生活帶來(lái)了巨大變化。但從上世紀(jì)40年代，隨著抗生素作為飼料添加劑的廣泛應(yīng)用，其種種弊端也逐漸被人們所認(rèn)識(shí)。比如導(dǎo)致動(dòng)物胃腸道正常菌群失調(diào)，產(chǎn)生耐藥性和藥物殘留等副作用，給動(dòng)物和人類的健康帶來(lái)很大了危害。于是，國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者日趨關(guān)注和尋找能夠克服上述弊端的抗生素替代物，益生菌的研究開發(fā)便隨之引起各國(guó)的重視。 該文從市售益生菌產(chǎn)品中分離篩選得到乳酸菌和酵母菌的優(yōu)良菌株，從微生物保藏機(jī)構(gòu)購(gòu)買霉菌。通過(guò)對(duì)菌株單

2、獨(dú)發(fā)酵特性和保藏條件的研究，確立各種菌株的優(yōu)化增殖培養(yǎng)條件以及適合的保藏方法，為乳酸菌、酵母菌和霉菌在益生菌中的配伍使用提供應(yīng)用依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)對(duì)樣品進(jìn)行分離篩選，得到一株乳酸菌和酵母菌(編號(hào)為L(zhǎng)act.2和Y2)，經(jīng)過(guò)形態(tài)學(xué)和生理生化實(shí)驗(yàn)，鑒定為嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)和梨生布勒擲孢酵母(Bullerapiricola)。 對(duì)嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)、梨生布勒擲孢酵母(Bullerapiri

3、cola)和米曲霉As3.800的發(fā)酵特性進(jìn)行研究，確立了生長(zhǎng)的最佳培養(yǎng)基、pH、溫度。嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)的培養(yǎng)條件為：蔗糖2％，酵母膏0.5％，大豆蛋白凍0.5％，檸檬酸三銨0.2％，吐溫800.1％，K2HPO40.2％，CH3COONa0.5％，MnSO4·4H2O0.025％，MgSO4·7H2O0.058％，pH6.00，35℃；梨生布勒擲孢酵母(Bullerapiricola)為：葡萄糖1％，酵母膏0.

4、3％，大豆蛋白胨0.5％，麥芽汁0.3％，pH5.50，30℃，150r.min-1；米曲霉As3.800為：可溶性淀粉3％，酵母膏0.3％，NaCl0.05％，MgSO4·7H2O0.05％，F(xiàn)eSO40.001％，K2HPO40.1％，pH6.00，30℃，150r.min～。在此培養(yǎng)條件下，乳酸菌活菌數(shù)為9.0×109CFU.mL-1，酵母菌活菌數(shù)為2.0×109CFU.mL-1，霉菌生物量為19.22mg.mL-1。 對(duì)

5、嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)、梨生布勒擲孢酵母(Bullerapiricola)和米曲霉As3.800代謝產(chǎn)物對(duì)菌體生長(zhǎng)的影響進(jìn)行了研究，在實(shí)驗(yàn)條件下，代謝產(chǎn)物基本不影響菌體的生長(zhǎng)；對(duì)三種菌進(jìn)行了共培養(yǎng)的初步研究，在厭氧條件下，乳酸菌生物量較高，酵母菌和霉菌生物量較低。鑒于益生菌應(yīng)用中，乳酸菌的功效占主導(dǎo)地位，酵母菌和霉菌起輔助營(yíng)養(yǎng)作用，因此，乳酸菌、酵母菌和霉菌的復(fù)配使用基本可行。 對(duì)乳酸菌和酵母菌進(jìn)行了液態(tài)保藏的

6、研究發(fā)現(xiàn)，低pH值環(huán)境加快菌體的消亡，中性pH值更適合菌體的存活；凍干保藏的研究表明，10％蔗糖溶液對(duì)嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)的凍干保護(hù)效果最好，10％可溶性淀粉對(duì)梨生布勒擲孢酵母(Bullrapiricola)的凍干保護(hù)效果最好；一定濃度范圍內(nèi)，保護(hù)劑濃度的升高會(huì)增加對(duì)菌體細(xì)胞膜的保護(hù)面積，保護(hù)效果也隨之增加。 通過(guò)分離出優(yōu)良菌株，進(jìn)行高密度培養(yǎng)，尋找有效的保藏方法，是微生態(tài)制劑產(chǎn)業(yè)的主要思路和技術(shù)關(guān)鍵點(diǎn)。該文