依娜普利、厄貝沙坦和血管緊張素-(1-7)對快速心房起搏犬心房肌鈉通道電流及其通道基因表達的影響.pdf

1、目的：房顫(atrial fibrillation，AF)會造成心房電重構(atrial electrical remodeling，AER)，AER所導致的動作電位時程(APD)、有效不應期(ERP)縮短，不應期離散度增加，心房不應性對心律改變的適應性改變，使AF得以維持?，F已明確，細胞內Ca2+超載是AF時誘發(fā)心房電重構的主要因素。許多學者通過動物實驗及臨床研究證實快速性心房起搏(RAP)可誘發(fā)類同于AF的心房電重構。快速起搏實驗動

2、物模型心房肌細胞的研究已發(fā)現鈉通道電流(INa)密度及基因和通道蛋白表達下降，而在人類AF患者，多數學者認為RAP對INa密度及表達無明顯影響。近年的動物實驗及臨床研究也表明，腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的激活與AF的發(fā)生、發(fā)展以及復發(fā)密切相關；此外，血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)可通過激活鈣通道電流及磷脂酰肌醇途徑導致細胞內鈣超載，因此在AER過程中起關鍵作用，抑制AngⅡ可延緩AER的發(fā)生及進展。關于RAS抑制劑對AF預防作用的研究也提

3、示RAS可能是AF心房電重構的重要媒介。血管緊張素-(1-7)[Ang-(1-7)]是RAS系統(tǒng)的一個具有生物活性的獨立成員，具有與AngⅡ相拮抗的作用。我們的前期實驗研究闡明了血管緊張素轉換酶抑制劑(ACEI)依那普利、血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)厄貝沙坦及Ang-(1-7)對快速心房起搏犬心房肌L型鈣通道電流(Ica-L)、瞬時外向鉀電流(ITO)及其基因表達的影響，但這三種干預因素對INa及其基因表達的影響尚不明確。故本研究建

4、立犬快速心房起搏房顫模型以觀察ACEI、ARB及Ang-(1-7)對INa及其基因表達的影響。
　　 方法：普通雜種犬30只隨機分為5組，假手術組(Sham組)，心房起搏組(Control組)，心房起搏+依那普利組(Enalapril組)，心房起搏+厄貝沙坦組(Irbesartan組)，心房起搏+Ang-(1-7)組[Ang-(1-7)組]，每組6只。特制心房起搏器(AOO)埋于肩胛后囊袋，起搏電極經右頸外靜脈固定于右心房。在心

5、房起搏組、起搏+依那普利組、起搏+厄貝沙坦組及起搏+Ang-(1-7)組，給予500bpm維持起搏2周。假手術組安置起搏器但不行起搏刺激。實驗過程中起搏+依那普利組、Irbesartan組及Ang-(1-7)組犬分別接受口服依那普利2mg·kg-1·d-1，厄貝沙坦60mg·kg-1·d-1或經頸靜脈途徑Ang-(1-7)6μg·Kg-1·h-1。起搏過程結束后，分離左房肌細胞行全細胞電流INa記錄，觀察各組犬INa電流密度的差異。以右

6、房肌組織行RT-PCR研究，觀察鈉通道蛋白Nav1.5α亞單位基因表達情況。
　　 結果：心房起搏組INa最大電流密度為-32.65±10.92 pA/pF(n=28)，較假手術組(-61.56±14.17 pA/pF，n=14)減少46.96％，P<0.05；與心房起搏組相比，INa最大電流密度在起搏+依那普利組為-44.11±16.76 pA/pF(n=11)、起搏+厄貝沙坦組為-65.2±14.79 pA/pF(n=13)

7、和起搏+Ang-(1-7)組為-66.56±18.08 pA/pF(n=11)，較心房起搏組分別增加35.10％，99.82％和103.86％(P<0.05)。假手術組INa半激活電位(V1/2act)為-50.68±4.45 mV(n=14)，心房起搏組為-49.43±4.44mV(n=28)，兩組之間無顯著差異(P>0.05)；INa半激活電位在起搏+依那普利組、起搏+厄貝沙坦組和起搏+Ang-(1-7)組分別為-54.46±5.4

8、3 mV(n=11)，-55士5.35mV(n=13)，-57.40士3.28 mV(n=11)，與假手術組和心房起搏組相比，更趨向于超極化，具有顯著性差異(P<0.05)。四個干預組INa激活曲線的斜率因子Kact分別為心房起搏組1.774±1.31，起搏+依那普利組0.95±1.14，起搏+厄貝沙坦組0.85±1.09，起搏+Ang-(1-7)組0.57±0.75，與假手術組(0.754±0.99)相比，均無顯著性差異。各干預組IN

9、a半失活電壓(V1/2inact)和失活曲線斜率因子(Kinact)分別為心房起搏組-89.16士5.40 mV和4.57±0.48，起搏+依那普利組-92.40士2.59mV和4.78±0.35，起搏+厄貝沙坦組-88.31±9.12mV和4.61±0.76，起搏+Ang-(1-7)組-90.92士3.00 mV和4.65±0.55，與假手術組(-84.89±4.05mV和4.16±0.81)相比均無顯著性差異。與假手術組相比，心房起

10、搏組Nav1.5α亞單位mRNA表達明顯降低(P<0.05)；與心房起搏組相比，依那普利、厄貝沙坦可逆轉快速心房起搏所致的Nav1.5α亞單位mRNA的表達水平的降低(P<0.05)，Ang-(1-7)對其則無明顯影響(P>0.05 vs心房起搏組)。
　　 結論：快速心房起搏可以通過降低犬心房肌Nav1.5α亞單位mRNA表達而降低INa電流幅度；依那普利、厄貝沙坦可通過超極化INa半激活電位和逆轉Nav1·5α亞單位mRNA