PPAR-γ激動劑PIO對Apoe---小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及動脈粥樣硬化的保護(hù)作用.pdf

1、目的:探討PPAR-γ激動劑PIO對Apoe-/-小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及動脈粥樣硬化的保護(hù)作用及其可能作用機(jī)制。
　　方法:
　　1)6周齡的C57BL/6小鼠12只為對照組（A組），體重20-22g左右，給予正?；A(chǔ)飼料、常規(guī)飲水。6周齡的Apoe-/-小鼠48只，體重在20-22g左右，隨機(jī)分成(B、C、D、E)四組。給予Apoe-/-小鼠高糖高脂配方飼料:15％蔗糖、4％膽固醇、0.3％膽酸鹽、10％豬油、10％蛋黃粉

2、、60.7％基礎(chǔ)飼料8周，正常飲水。
　　2) Apoe-/小鼠(D、E)兩組在12周齡按80mg/KgSTZ連續(xù)腹腔注射3天，造成糖尿病模型，血糖值均＞11.1 mmol/L。
　　3)小鼠在14w時，給予動脈粥樣硬化組（C組）及動脈粥樣硬化+糖尿病組（E組）吡格列酮(PIO)治療，溶于純凈水后按100mg/Kg.d灌胃，同時野生型小鼠（A組）、動脈粥樣硬化（B組）、動脈粥樣硬化+糖尿病組（D組）給予純凈水對照灌胃，連續(xù)給

3、藥8周。
　　4) PIO治療8周后，摘眼球取全血測血糖(GLU)、膽固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、及晚期糖基化終產(chǎn)物(AGEs)。提取小鼠主動脈到髂分叉的血管總蛋白，用Western blot檢測晚期糖基化終產(chǎn)物自身受體(RAGE)、血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)、細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)、絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、

4、腫瘤壞死因子(TNF-α)、核因NF-κB、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)及磷酸腺苷蛋白激酶(AMPK)的變化情況。做主動脈石蠟切片進(jìn)行HE染色并做大體動脈的油紅O染色來觀察主動脈粥樣斑塊病變情況
　　結(jié)果:
　　1)通過生化檢測，證實(shí)PPARγ激動劑PIO能降低血清LDL-C、CHO，升高HDL-C;
　　2)通過ELLISA法檢測AGEs，Western blot檢測RAGE，證實(shí)PPARγ激動劑PIO可以直接抑制A

5、GEs、RAGE的產(chǎn)生;
　　3) Western blot檢測內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)顯示:PPARγ激動劑PIO可以減少血管內(nèi)皮細(xì)胞1CAM-1、VCAM-1的表達(dá)，上調(diào)eNOS;
　　4) Western blot檢測炎癥因子NF-κB及TNF-α的表達(dá)顯示:PPARγ激動劑PIO可以抑制NF-κB的活化及TNF-α的表達(dá);
　　5)主動脈石蠟切片進(jìn)行HE染色及大體動脈的油紅O染色的結(jié)果顯示:PPARγ激動劑PIO不

6、僅可以減少了合并糖尿病Apoe-/-小鼠組的動脈粥樣硬化斑塊面積，而且減少了非糖尿病Apoe-/-小鼠組的粥樣斑塊面積。同時PPARγ激動劑PIO治療可以減少降解細(xì)胞外基質(zhì)的黏蛋白酶基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)。
　　結(jié)論:PPARγ激動劑PIO可以降低GLU、LDL-C、CHO，升高HDL-C; PIO可以保護(hù)ApoE-/-小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，如減少血管粘附分子ICAM-1、VCAM-1的產(chǎn)生和上調(diào)eNOS的表達(dá);PIO可以減