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文檔簡介
1、苯乙醇苷(Phenylethanoid glycosides,PhGs)是以β-吡喃葡萄糖為母核,通過酯鍵和糖苷鍵與取代肉桂?;腿〈揭一噙B的酚類化合物,常見的PhGs包括毛蕊花糖苷、紅景天苷、松果菊苷等。PhGs具有抗腫瘤、抗炎癥、神經(jīng)保護(hù)、抗氧化、美白等功效,被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域。但是PhGs的生物利用度較低,其中毛蕊花糖苷的生物利用度僅為0.12%。因此,探究PhGs生物利用度的影響機(jī)制并探索提高其生物利用度的
2、途徑,對于提高PhGs的利用率、拓展PhGs的使用范圍具有十分重要的意義。
本文以桂花總苯乙醇苷(Total phenylethanoid glycosides,TPG)、紅景天苷和毛蕊花糖苷為研究對象,結(jié)合色譜、質(zhì)譜、體外消化模型、Caco-2細(xì)胞吸收模型等方法,從PhGs的穩(wěn)定性和體內(nèi)消化吸收兩方面進(jìn)行研究,闡明其對生物利用度的影響機(jī)制,并采用食源性天然P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制劑和納米技術(shù)構(gòu)
3、建PhGs的納米載體系統(tǒng),旨在提高PhGs的穩(wěn)定性和生物利用度。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
1.模擬貯藏條件,研究溫度、光照和pH對PhGs穩(wěn)定性的影響,建立PhGs的降解動力學(xué)模型,明確紅景天苷和毛蕊花糖苷的降解產(chǎn)物,探討紅景天苷和毛蕊花糖苷的降解途徑。結(jié)果表明,TPG、紅景天苷和毛蕊花糖苷的降解遵循一級動力學(xué)模型,其中毛蕊花糖苷的穩(wěn)定性較差,在高溫、光照、高pH條件下會快速降解。貯藏過程中紅景天苷發(fā)生水解反應(yīng),生成酪醇。高溫
4、條件(≥50℃)貯藏時(shí),毛蕊花糖苷發(fā)生水解、異構(gòu)化和氧化反應(yīng),生成verbasoside、異毛蕊花糖苷、β-oxoacteoside、campneosideⅡ等物質(zhì);堿性條件(pH9.0)貯藏時(shí),毛蕊花糖苷發(fā)生水解、異構(gòu)化、氧化和環(huán)化反應(yīng),生成cistanoside F、異毛蕊花糖苷、campneosideⅡ、oraposide等物質(zhì);其它條件貯藏時(shí),毛蕊花糖苷發(fā)生水解和異構(gòu)化反應(yīng),生成咖啡酸、verbasoside和異毛蕊花糖苷。
5、r> 2.利用體外消化模型和Caco-2細(xì)胞模型研究PhGs的消化穩(wěn)定性及吸收轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。結(jié)果表明,TPG、紅景天苷和毛蕊花糖苷消化后的保留率分別為82.31%、99.77%和51.46%,消化過程中毛蕊花糖苷較不穩(wěn)定;在Caco-2細(xì)胞模型中的吸收率分別為1.42~1.54%、2.10~2.68%和0.46~0.70%,毛蕊花糖苷較難吸收。TPG和毛蕊花糖苷的轉(zhuǎn)運(yùn)方式為主動外排,P-gp參與轉(zhuǎn)運(yùn)過程,而紅景天苷的轉(zhuǎn)運(yùn)方式為被動運(yùn)輸,外
6、排蛋白不參與轉(zhuǎn)運(yùn)。
3.采用Caco-2細(xì)胞模型篩選促進(jìn)毛蕊花糖苷吸收的食源性天然P-gp抑制劑,并研究其對毛蕊花糖苷穩(wěn)定性和代謝動力學(xué)的影響。結(jié)果表明,天然P-gp抑制劑槲皮素和表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)可以提高毛蕊花糖苷在Caco-2細(xì)胞中的吸收,但兩者對毛蕊花糖苷的貯藏穩(wěn)定性和消化穩(wěn)定性無改善作用,EGCG可將毛蕊花糖苷的生物利用度提高1.43倍。
4
7、.構(gòu)建并表征毛蕊花糖苷(Ac)和毛蕊花糖苷EGCG(AE)的脂質(zhì)體(Ac-Lip和AE-Lip)、殼聚糖修飾的脂質(zhì)體(CS-Ac-Lip和CS-AE-Lip)和脂質(zhì)體殼聚糖三聚磷酸鈉粒子(CS-Ac-Lip-TPP和CS-AE-Lip-TPP)納米載體。結(jié)果表明,Ac或AE被包裹于脂質(zhì)體中心,殼聚糖通過靜電作用修飾于脂質(zhì)體表面,生成殼聚糖修飾的脂質(zhì)體。進(jìn)一步與TPP發(fā)生離子交聯(lián)后,生成脂質(zhì)體殼聚糖三聚磷酸鈉粒子。上述納米粒子外形類似球狀
8、,粒徑在69.62~169.73 nm之間,Ac-Lip和AE-Lip帶負(fù)電,其它納米粒子帶正電,包封率(除AE-Lip之外)均在80%以上。
5.針對上述構(gòu)建的納米載體,評價(jià)其體外釋放、貯藏穩(wěn)定性、消化穩(wěn)定性、代謝動力學(xué)和組織分布特性。結(jié)果表明,上述構(gòu)建的納米載體:具有緩釋性,其體外釋放符合Korsmeyer-Peppas模型;提高了毛蕊花糖苷的貯藏穩(wěn)定性和消化穩(wěn)定性,CS-Ac-Lip-TPP和CS-AE-Lip-TPP具
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