HIV-1Vpr與干擾素誘導(dǎo)蛋白IFP35間的相互作用初探.pdf

1、自上個(gè)世紀(jì)80年代首例艾滋病病例被發(fā)現(xiàn)后，艾滋病在全世界范圍內(nèi)迅速蔓延，已成為當(dāng)今人類所面臨的最嚴(yán)重、最棘手的傳染性疾病之一。究其原因，主要在于其病原體——人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）的獨(dú)特生物學(xué)特性。HIV基因組為二倍體單正鏈RNA，其變異率高為預(yù)防和治療造成了巨大的困難。因此，至今尚未找到徹底治愈的有效方法。盡管如此，各國(guó)政府和科學(xué)家們?nèi)詾楣タ税滩恍概?，到目前為止，?duì)于HI

2、V的感染、復(fù)制及其與宿主細(xì)胞內(nèi)各信號(hào)通路和調(diào)控機(jī)制的相互關(guān)聯(lián)的研究已經(jīng)有了長(zhǎng)足的進(jìn)展，同時(shí)也為新藥研發(fā)和臨床治療帶來(lái)了曙光。
　　 HIV屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒屬，具有復(fù)雜的基因組結(jié)構(gòu)和完善的基因表達(dá)調(diào)節(jié)機(jī)制。Vpr是其六種非結(jié)構(gòu)蛋白之一，不但與病毒的復(fù)制速率有關(guān)，而且參與被感染細(xì)胞中諸多蛋白的表達(dá)和信號(hào)通路的調(diào)控，并在行使功能時(shí)，常與多種宿主蛋白相結(jié)合。在本實(shí)驗(yàn)室的前期工作中，以Vpr作為“誘餌”，通過酵母雙雜技術(shù)“釣到”其相

3、互作用蛋白IFP35。
　　 IFP35是一種由干擾素誘導(dǎo)產(chǎn)生的蛋白，依賴其自身的亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)與其他蛋白相互作用，但I(xiàn)FP35的具體功能尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)室前期的研究發(fā)現(xiàn)，IFP35對(duì)泡沫病毒具有抑制效果，而它對(duì)HIV的作用還有待進(jìn)一步探索。
　　 本文就是在酵母雙雜交結(jié)果的基礎(chǔ)上，對(duì)Vpr和IFP35在功能上的相互影響進(jìn)行了研究探討。主要獲得了以下幾個(gè)方面的結(jié)果：1）通過CO-IP實(shí)驗(yàn)確證了Vpr和IFP35的相互作用

4、；2）利用熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)證明了Vpr不能在轉(zhuǎn)錄水平上對(duì)IFP35產(chǎn)生影響，但Western Blot結(jié)果表明Vpr可以使IFP35蛋白的穩(wěn)定性增加；3）利用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)證明了Vpr可以單獨(dú)激活或協(xié)同Tat蛋白激活HIV-1的長(zhǎng)末端重復(fù)序列(long terminal repeat,LTR)，這種激活呈劑量依賴性，而IFP35并不會(huì)對(duì)上述激活作用產(chǎn)生明顯影響。
　　 本文研究HIV非結(jié)構(gòu)蛋白Vpr與干擾素誘導(dǎo)蛋白IFP35