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1、目的:利用APC突變開發(fā)可用于ctDNA稀有突變檢測(cè)的方法。
方法:以APC基因?yàn)槟康幕蜻M(jìn)行研究,APC基因是cDNA上4012位的一個(gè)熱點(diǎn)突變(C→T),這是一個(gè)特殊的點(diǎn)突變(CTGCAG→CTGTAG),突變后產(chǎn)生一個(gè)終止密碼子,同時(shí)CTGACG是限制性內(nèi)切酶PstI的識(shí)別位點(diǎn)。利用PCR、藍(lán)白篩選和限制性內(nèi)切酶相結(jié)合的方法建立一種高敏感性和無(wú)假陽(yáng)性的突變點(diǎn)檢測(cè)方法。在此基礎(chǔ)上同時(shí)探究出一種的新型檢測(cè)方法-基因型轉(zhuǎn)換。<
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