小鼠胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為胰島素分泌細(xì)胞的初步研究.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文小鼠胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為胰島素分泌細(xì)胞的初步研究姓名：鄧愛民申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：盧光琇20040501胞內(nèi)nestin表達(dá)陽(yáng)性。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，直徑為150246139m；101885789in：55905461ma3組不同大小的擬胚體經(jīng)選擇后，nestin陽(yáng)性細(xì)胞百分比分別為3526246；4103343和2993254。直徑為10188578pro大小的擬胚體選擇培養(yǎng)后，nestin陽(yáng)性細(xì)

2、胞百分比明顯高于另外兩組，兩兩比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(pO05)。2、用lOmM煙堿誘導(dǎo)后的nestin陽(yáng)性細(xì)胞可以形成胰島樣的細(xì)胞團(tuán)狀結(jié)構(gòu)，免疫組化檢測(cè)顯示：在誘導(dǎo)分化后第5d沒有出現(xiàn)insulin陽(yáng)性細(xì)胞，15d后，胰島樣細(xì)胞團(tuán)insulin表達(dá)陽(yáng)性。流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示：OmM、5mM、lOmM3種濃度的煙堿誘導(dǎo)15d后得到的insulin陽(yáng)性細(xì)胞的百分比分別為299a：152；4082691485a：276。lOmM組與OmM或5m

3、M兩組比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p001)。3、煙堿誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞在葡萄糖刺激下能分泌胰島素。55mM濃度的葡萄糖刺激分化細(xì)胞后，收集的條件培養(yǎng)基中胰島素濃度為7461土501(pU／m1)；25mM濃度的葡萄糖刺激分化細(xì)胞后，收集的條件培養(yǎng)基中胰島素濃度為10329485(舢)。兩組分別與自發(fā)分化的對(duì)照組比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(廬O01)。55raM葡萄糖組與25raM葡萄糖組比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(∥，o05)。結(jié)論：l、小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)煙堿誘導(dǎo)可以分