內(nèi)抑素組織表達趨勢與腎間質(zhì)微血管損傷的相關性研究.pdf

1、目的：探討在幼年大鼠腎間質(zhì)微血管損傷過程中內(nèi)抑素（endostatin, ENS）、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endotheliAlgrowth factor, VEGF)、CD31組織定位表達的趨勢、相關性及其潛在的病理意義，以及用阿托伐他汀干預的效應。
　　 方法：（1）采用單側輸尿管結扎的方法制備實驗性梗阻性腎小管間質(zhì)損傷模型（UUO模型）；3-4周齡幼年雄性SD大鼠72只，分為正常對照組（24只）、模型組（24

2、只）、模型干預組（24只），于實驗第1、3、7、14天每組各取6只大鼠，取病變腎臟石蠟包埋并切片；（2）HE 染色觀察腎小管萎縮擴張、間質(zhì)微血管損傷情況；（3）Masson 染色評價腎間質(zhì)纖維化程度；（4）免疫組化方法檢測大鼠腎組織ENS、VEGF及CD31的表達，并從時間和組織定位表達趨勢上評價ENS、VEGF及CD31的相關性，探討ENS在腎間質(zhì)微血管損傷中的作用；（5）用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理。
　　 結果

3、：（1）常規(guī)HE及Masson 染色：正常對照組腎臟結構無明顯病理改變；模型組術后術后3天即可見遠端腎小管擴張，管周毛細血管減少，腎間質(zhì)輕度水腫，術后7天近端腎小管擴張明顯，間質(zhì)中大量炎細胞浸潤，部分小管上皮細胞變性壞死；第14天可見彌漫的腎小管基底膜增厚皺縮，膠原增多，纖維化明顯，膠原纖維染色綠染面積增多，且不同時間點差異有顯著統(tǒng)計學意義（P 均<0.01）。模型干預組各時間點腎間質(zhì)病變程度較模型組輕，但較對照組重（P 均<0.01）

4、。（2）免疫組化染色測定腎間質(zhì)ENS、VEGF及CD31蛋白表達情況：?對照組：ENS蛋白弱表達于腎小球上皮細胞和腎小管周圍毛細血管內(nèi)皮細胞胞漿，腎小管上皮細胞內(nèi)幾乎無表達，各時間點差異無顯著性（P 均>0.05）。VEGF蛋白廣泛表達于腎小球上皮細胞、腎小管上皮細胞及足突細胞，呈黃色顆粒狀分布于細胞胞漿中，各時間點差異無顯著性（P 均>0.05）；CD31蛋白廣泛表達于腎小球內(nèi)皮細胞和腎小管周圍毛細血管內(nèi)皮細胞中，呈黃色顆粒狀分布于細

5、胞胞漿中，各時間點差異無顯著性（P 均>0.05）；②模型組：ENS蛋白術后1天在腎小管上皮細胞部位的表達漸增加，陽性信號強于對照組，且在間質(zhì)中出現(xiàn)片狀表達，隨著實驗時間的延續(xù)，病變的加重，上述表達趨勢明顯加強，7d時表達最強，后隨病變的發(fā)展表達反而較前下降；VEGF 術后7天，足突細胞未見陽性表達，部分腎小管上皮細胞胞漿中有弱陽性表達表達陽性程度弱于正常對照組；隨著腎間質(zhì)病理損傷程度加重，VEGF表達的陽性面積均呈顯著遞減，術后第14

6、天，表達明顯減弱；CD31術后第1天在腎小球內(nèi)皮細胞和腎小管周毛細血管內(nèi)皮細胞有表達，術后3天，CD31表達開始減弱隨著腎間質(zhì)病理損傷程度加重，腎小管周圍毛細血管密度明顯遞減，術后14天表達減弱明顯。三種蛋白表達各時間點組內(nèi)比較差異有顯著性（P 均<0.01），各時間點與對照組比差異有顯著性（P 均<0.01）；③模型干預組：ENS蛋白表達各時間點明顯低于模型組，但高于對照組，差別有均有統(tǒng)計學意義（P 均<0.01）；CD31蛋白表達各

7、時間點明顯高于模型組，但低于對照組，差別有均具有統(tǒng)計學意義（P 均<0.01）。（3）相關性分析：模型組ENS與VEGF及CD31之間相關系數(shù)r值均小于零，呈負相關關系，VEGF與CD31之間相關系數(shù)r值大于零，呈正相關關系(P 均<0.01)。
　　 結論：本研究提示UUO 幼鼠腎間質(zhì)纖維化早期腎間質(zhì)內(nèi)ENS表達上調(diào)，VEGF與CD31表達下調(diào)，ENS與CD31及VEGF表達呈負相關，VEGF與CD31表達呈正相關。表明在幼年