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1、目的:膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,移行細(xì)胞癌(TCC)是其最常見(jiàn)病理類(lèi)型。腫瘤分級(jí)、分期是目前評(píng)估膀胱移行細(xì)胞癌惡性程度、預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后的最常用指標(biāo),但由于腫瘤的生物學(xué)異質(zhì)性,單以分級(jí)、分期來(lái)評(píng)估預(yù)后有一定的局限性。實(shí)際上,尋找獨(dú)立于腫瘤分級(jí)、分期,而又能有效的指導(dǎo)評(píng)估腫瘤預(yù)后的輔助指標(biāo)的工作從沒(méi)有停止過(guò)。腫瘤細(xì)胞所合成的某些蛋白,可以作為腫瘤標(biāo)記物而對(duì)腫瘤的診斷、治療及判斷預(yù)后有重要的參考價(jià)值。某些或某種腫瘤標(biāo)記物在腫瘤中的表
2、達(dá)或過(guò)表達(dá),對(duì)于判斷腫瘤的某些生物學(xué)行為有重要的預(yù)測(cè)意義。腫瘤侵襲性首先表現(xiàn)在腫瘤組織對(duì)臨近組織的破壞,進(jìn)而才可能發(fā)生轉(zhuǎn)移。若能找到某種腫瘤標(biāo)記物來(lái)預(yù)測(cè)腫瘤細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移性的高低,將對(duì)治療和預(yù)后產(chǎn)生重大影響,同樣若能提前對(duì)腫瘤是否對(duì)化療藥產(chǎn)生耐藥作出預(yù)測(cè),對(duì)治療方法的選擇將有莫大的益處。內(nèi)皮素-1(Endothelin-1,ET-1)是一種促血管生成因子,多數(shù)研究認(rèn)為ET-1與膀胱腫瘤分級(jí)、腫瘤復(fù)發(fā)、預(yù)后顯著相關(guān),但其與膀胱腫瘤分期、腫
3、瘤微血管密度(MVD)相關(guān)性的認(rèn)識(shí)目前仍存在分歧。 本研究對(duì)54例膀胱移行細(xì)胞癌組織及13例正常膀胱粘膜組織的石蠟切片采用免疫組織化學(xué)SP染色方法檢測(cè)其ET-1表達(dá)情況以及以血管內(nèi)皮細(xì)胞表面抗原CD34單抗標(biāo)記測(cè)定MVD,從而探討ET-1與MVD在膀胱腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用以及臨床意義。方法:腫瘤組織標(biāo)本取自2006-2008年間河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科膀胱TCC患者54例,其中男性47例,女性7例,年齡36-79歲,平均67
4、.5歲,年齡≥60歲39例,<60歲19例;TURBt獲得者40例,膀胱部分切除5例,膀胱全切9例;腫瘤單發(fā)18例,多發(fā)36例:初發(fā)35例,復(fù)發(fā)19例。分級(jí)按WHO標(biāo)準(zhǔn):Gl級(jí)23例,G2級(jí)21例,G3級(jí)10例。臨床分期按UICC標(biāo)準(zhǔn)Tis-T1為33例,T2為18例,T3為2例,T4為1例。13例非膀胱腫瘤者的正常膀胱組織,均為男性,年齡23-74歲,平均61.4歲。應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP方法染色標(biāo)本。根據(jù)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):ET-1以細(xì)胞漿
5、或胞核染成棕黃色或棕褐色為陽(yáng)性標(biāo)志,染色結(jié)果以陽(yáng)性細(xì)胞百分比結(jié)合染色強(qiáng)度綜合計(jì)分作定性分析。高倍鏡下隨機(jī)觀察5個(gè)視野,每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,計(jì)算其陽(yáng)性率:<25%為0分,25%-50%為1分,51%-75%為2分,>75%為3分:按細(xì)胞顯色及染色深淺分:無(wú)顯色0分,淺棕黃色1分,棕黃色2分,棕褐色3分。兩分相加<2分為陰性,2-3分為弱陽(yáng)性,4-5分為陽(yáng)性。MVD的判定標(biāo)準(zhǔn):CD34以血管內(nèi)皮細(xì)胞染成黃色或棕黃色為陽(yáng)性。先在低倍鏡下
6、(100×)尋找高血管密度區(qū),然后在高倍視野內(nèi)(200×)計(jì)數(shù)微血管的數(shù)目。以與周?chē)[瘤細(xì)胞和結(jié)締組織成分明顯區(qū)別的任何一個(gè)血管計(jì)數(shù),記錄5個(gè)視野內(nèi)的微血管數(shù),取其平均值作為該病的MVD值。將所有數(shù)據(jù)均用SPSS13.0版統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。其中計(jì)數(shù)資料相關(guān)性統(tǒng)計(jì)采用卡方檢驗(yàn),計(jì)量資料相關(guān)性統(tǒng)計(jì)采用t檢驗(yàn),ET-1表達(dá)與MVD計(jì)算之間的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析法。結(jié)果:1 ET-1的表達(dá):正常膀胱與膀胱癌組織中的陽(yáng)性率為7
7、.7%、53.7%差異有顯著性意義(P<0.05):膀胱癌G1級(jí)、G2級(jí)、G3級(jí)的陽(yáng)性率分別為52.2%、57.2%、70%,G1級(jí)的陽(yáng)性率52.2%低于G2級(jí)、G3級(jí)之和61.3%,有顯著性差異(P<0.05);浸潤(rùn)性膀胱癌(T2-T4)和淺表性膀胱癌(Tis-T1)的陽(yáng)性率分別為57.2%和51.5%,有顯著性差異(P<0.05);單發(fā)膀胱癌和多發(fā)膀胱癌的陽(yáng)性率為44.5%和58.3%,差異不明顯;初發(fā)膀胱癌和復(fù)發(fā)膀胱癌的陽(yáng)性率分別
8、為45.7%和68.4%,有顯著性差異(P<0.05);年齡≥60歲和<60歲的陽(yáng)性率分別為51.2%和60.0%,無(wú)明顯差異。 2.MVD的分布:正常膀胱粘膜為(17.4±4.5),膀胱癌組織為(34.3±9.5),兩者相比,MVD在膀胱癌組織中的分布明顯高于正常膀胱粘膜組織(P<0.05)。G1級(jí)、G2級(jí)、G3級(jí)膀胱癌分別為(31.2±5.1),(30.0±7.1),(50.3±2.8)相互比較,G1級(jí)、G2級(jí)之間差異不明顯
9、,而G3級(jí)的MVD明顯高于G1級(jí)、G2級(jí)(P<0.05):浸潤(rùn)性膀胱癌(T2-T4)和淺表性膀胱癌(Tis-T1)為(40.3±11.4),(30.4±5.5),有明顯差異(P<0.05);單發(fā)膀胱癌和多發(fā)膀胱癌為(38.4±10.6),(32.1±8.2),無(wú)明顯差異;初發(fā)膀胱癌和復(fù)發(fā)膀胱癌為(30.1±5.7),(41.8±10.6),有明顯差異(P<0.05);年齡≥60歲和年齡<60歲為(35.5±3.6),(34.6±6.0)
10、,無(wú)明顯差異。 3.ET-1表達(dá)陽(yáng)性者M(jìn)VD為(38.6±5.9),ET-1表達(dá)陰性者M(jìn)VD為(30.5±4.8),兩者有明顯相關(guān)性(t=2.637,P<0.01)。 結(jié)論:1 膀胱移行細(xì)胞癌中ET-1的表達(dá)、MVD的分布明顯高于正常膀胱組織。 2.ET-1及MVD在膀胱移行細(xì)胞癌的分級(jí)、分期、初發(fā)和復(fù)發(fā)中有明顯差異。 3.ET-1 可以促進(jìn)腫瘤血管的生成。 4 ET-1的表達(dá)和MVD的檢測(cè)可以作
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