感染后IBS患者內(nèi)臟高敏感性與蛋白酶激活受體表達關(guān)系研究.pdf

1、研究目的：
　　 通過把臨床癥狀積分和直腸容量感覺閾值作為PI-IBS內(nèi)臟敏感性的指標(biāo)，研究其和實驗測定的PI-IBS患者腸道粘膜和腸道肥大細胞上蛋白激活受體PAR2和PAR4的表達之間的聯(lián)系，來闡明PAR2和PAR4與PI-IBS患者內(nèi)臟高敏感性之間的關(guān)系，拓寬感染后IBS患者內(nèi)臟高敏感性發(fā)生機制。從而加深對PI-IBS的認識，以進一步揭示PI-IBS的發(fā)病機理，從而有效的指導(dǎo)臨床治療。
　　 研究方法：
　　

2、 收集符合國內(nèi)最新診斷標(biāo)準(zhǔn)的PI-IBS的腹瀉型患者23例，排除既往消化性潰瘍，慢性菌痢，甲狀腺疾病，腸道吸收不良綜合癥等疾病作為實驗組，同時在健康人群中采取自愿知情原則選擇17例，排除既往消化道疾病以及近期(2周)無急性感染性腸道疾病，作為對照組。依次進行以下幾部分實驗：(1)對實驗組腹痛為指標(biāo)進行臨床癥狀積分評定；(2)對實驗組和對照組進行直腸容量感覺閾值測定；(3)對實驗組和對照組提取腸黏膜組織標(biāo)本，分別利用RT-PCR技術(shù)檢測腸

3、粘膜上PAR2mRNA與PAR4mRNA表達；利用免疫組化分別行肥大細胞活性分析和肥大細胞計數(shù)，檢測腸粘膜PAR2與PAR4表達的改變；以及利用免疫熒光雙染技術(shù)檢測肥大細胞上PAR2與PAR4表達的改變。所有數(shù)據(jù)按有關(guān)方法測定相關(guān)指標(biāo)并進行統(tǒng)計學(xué)檢驗。
　　 研究結(jié)果：
　　 1、通過對實驗組和對照組進行直腸感覺閾值測定，發(fā)現(xiàn)實驗組直腸最初感覺容量及最大耐受容量明顯低于對照組，p<0.05，具體顯著意義，可以說明PI-I

4、BS患者腸道敏感性明顯高于正常健康人群。
　　 2、應(yīng)用RT-PCR技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)：對于PAR2 mRNA表達來說，對照組為4.317±0.154，實驗組為5.027±0.126，二者之間沒有顯著差異。而對于PAR4 mRNA表達來說，對照組為5.528±0.153，實驗組為3.406±0.172，二者比較p<0.05，具有顯著意義，也就是說，在PI-IBS患者的腸粘膜上PAR4 mRNA表達降低，有顯著差異。
　　 3、

5、應(yīng)用免疫組化技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)：結(jié)腸粘膜上PAR2陽性表達細胞在對照組為13.765±5.426，實驗組為14.609±6.111，二者之間沒有顯著差異，而對于PAR4陽性表達細胞來說，對照組為11.529±4.679，實驗組為8.739±3.744，二者比較p<0.05，具有顯著意義。本實驗環(huán)節(jié)再次證實在PI-IBS患者的腸粘膜上PAR4表達降低，而在PI-IBS患者的腸粘膜上PAR2表達沒有明顯變化。
　　 4、實驗數(shù)據(jù)顯示對照組

6、肥大細胞數(shù)目為5.172±1.245，實驗組肥大細胞數(shù)目為6.141±1.490，二者統(tǒng)計顯示p>0.05，沒有顯著性意義。對于脫顆粒肥大細胞，對照組為1.537±0.578，實驗組為2.832±1.186，p<0.01，具有顯著性意義。大多數(shù)的肥大細胞存在PAR4表達。肥大細胞PAR4表達陽性細胞占肥大細胞總數(shù)的百分比在實驗組為67.706±12.479，對照組為53.696±12.452。P<0.05，具有顯著性意義，肥大細胞PAR

7、4表達率在PI-IBS患者明顯下降。
　　 5、對肥大細胞上PAR4受體表達和臨床癥狀積分與直腸容量閾值相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)PAR4受體表達和臨床癥狀積分無顯著相關(guān)性，而PAR4受體表達和直腸初始感覺閾值和直腸最大耐受閾值具有正相關(guān)性，p<0.01，具有顯著性意義。可以推測PAR4和腸道敏感性具有負相關(guān)性。
　　 研究結(jié)論：
　　 1、試驗結(jié)果顯示，實驗組直腸容量感覺閾值容量減少，而健康人群的直腸容量感覺閾值明顯高于

8、PI-IBS患者，說明PI-IBS患者腸道敏感性增加。
　　 2、PI-IBS患者腸粘膜表達PAR2 mRNA和PAR4 mRNA。應(yīng)用RT-PCR技術(shù)和免疫組化技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)PI-IBS患者PAR2表達水平無顯著差異，而PI-IBS患者PAR4表達水平較對照組顯著降低。
　　 3、PI-IBS患者腸粘膜活性脫顆粒肥大細胞數(shù)目增多。PI-IBS患者腸粘膜肥大細胞上存在PAR4表達，和正常人群相比，PI-IBS患者PAR4表