人BRI-,3-編碼蛋白N端與SCG10的相互作用影響細(xì)胞微管結(jié)構(gòu).pdf

1、BRI<,3>基因?qū)儆贐RI基因家族的一員,目前得到分離鑒定的該家族成員包括BRI<,1-3>.BRI<,3>屬于Ⅱ型單跨膜蛋白,有一個(gè)跨膜區(qū),N端較短,C端較長.生物信息學(xué)分析沒有發(fā)現(xiàn)任何的亞細(xì)胞定位信號(hào)和功能結(jié)構(gòu)域.該實(shí)驗(yàn)室前期工作已經(jīng)完成了BRI<,3>的表達(dá)譜分析和表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位分析.更為重要的是在前期工作中,以hBRI<,3>蛋白的N端作為誘餌蛋白,利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選人胎腦cDNA文庫,發(fā)現(xiàn)SCG10蛋白與BRI<,

2、3>蛋白的N端發(fā)生相互作用.在上述工作的基礎(chǔ)上,我們深入研究了BRI<,3>與SCG10相互作用的生物學(xué)效應(yīng).SCG10蛋白作為stathmin蛋白家族的一個(gè)成員,具有抑制微管組裝,促進(jìn)微管去組裝的功能.因此我們首先研究了BRI<,3>蛋白和SCG10蛋白對(duì)細(xì)胞微管結(jié)構(gòu)的影響.體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,BRI<,3>蛋白對(duì)SCG10蛋白引起的抑制微管組裝的過程沒有明顯影響;而對(duì)于其促進(jìn)微管去組裝、導(dǎo)致微管解聚的過程具有明顯的抑制作用.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研

3、究結(jié)果表明,BRI<,3>蛋白在PC12細(xì)胞中的過表達(dá)能夠顯著的抑制由SCG10蛋白過表達(dá)造成的細(xì)胞微管網(wǎng)絡(luò)的解體.因此,我們認(rèn)為BRI<,3>蛋白是一種在神經(jīng)元細(xì)胞中具有微管穩(wěn)定作用的蛋白,其通過與SCG10或其它蛋白的相互作用,來調(diào)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞的微管骨架結(jié)構(gòu).此外,作為一個(gè)跨膜分子,BRI<,3>(N)端參與調(diào)節(jié)細(xì)胞微管結(jié)構(gòu),為研究其是否在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)過程中發(fā)揮作用,我們還以BRI<,3>編碼蛋白質(zhì)的C端作為誘餌蛋白,利用酵母雙雜