htngα作用相關(guān)基因bri3的研究ⅰ.小鼠bri3基因的克隆及其功能的初步研究;ⅱ.用酵母雙雜合系統(tǒng)篩選與人bri3相互作用的蛋白質(zhì);ⅲ.人bri3相互作用蛋白bri3bp的基因克隆和定位

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文hTNGα作用相關(guān)基因BRI3的研究Ⅰ.小鼠BRI3基因的克隆及其功能的初步研究；Ⅱ.用酵母雙雜合系統(tǒng)篩選與人BRI3相互作用的蛋白質(zhì)；Ⅲ.人BRI3相互作用蛋白BRI3BP的基因克隆和定位姓名：林麗珠申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：趙壽元2001.5.1克隆( B R I B P l ) 的蛋白質(zhì)產(chǎn)物都能夠與B R l 3 蛋白相互結(jié)合．然后，將N C S l和B R I B P l 分別克隆到大腸桿菌表達(dá)

2、載體上進(jìn)行G S T 融合表達(dá)，再通過(guò)體外結(jié)合試驗(yàn)驗(yàn)證了融合蛋白與人B R l 3 蛋白的結(jié)合作用．聿研究工作的第三部分是，根據(jù)B R I B P l 的c D N A 序列，采用5 ’R A C E ( R a p i da m p l i f i c a t i o no fc D N Ae n d ) 和電子克隆技術(shù)，分離到一個(gè)全長(zhǎng)為1 ．9k b 的人類新基因的c D N A ．報(bào)送H U G O 基因命名委員會(huì)后被命名為B R

3、 l 3 B P ．陀舍有一個(gè)編碼2 5 1 個(gè)氨基酸殘基的完整開放閱讀框．信號(hào)肽分析顯示B R I S B 聲推導(dǎo)蛋白質(zhì)的N 端3 4 個(gè)氨基酸為信號(hào)肽．表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn)B R l 3 B P 基因有兩條不同長(zhǎng)度的轉(zhuǎn)錄本：7 ．4k b 和1 ．5k b ，而且在腦、腎和肝組織中表達(dá)豐度特別高．放射雜種細(xì)胞克隆( R H ) 將其定位，于人染色體1 2 q 2 4 ．2 ．q t e r 區(qū)帶的D 1 2 S 3 4 0 和D 1 2

4、S 9 7 之間．它在G e n B a n k 登錄注冊(cè)號(hào)為A F 2 8 4 0 9 4 ．因此，本項(xiàng)研究的創(chuàng)新點(diǎn)有：+一、從小鼠腦血管內(nèi)皮細(xì)胞中分離出細(xì)胞經(jīng)h T N F & 作用后差異表達(dá)的基因，其中有一個(gè)是功能未知的小鼠基因B R ／3 ．首次實(shí)驗(yàn)證明該基因具有誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的功能．二、首次證實(shí)與小鼠B R l 3 同源性達(dá)9 5 ％的人體B R l 3 蛋白相互作用的有三種蛋白質(zhì)，這為進(jìn)一步弄清B R ／3 基因的功能

5、提供了線索和材料．三、與色R J 3 蛋白相互作用的人體蛋白質(zhì)中有一個(gè)是由E S T 編碼的，從這個(gè)E S T出發(fā)，克隆到一個(gè)新的人類全長(zhǎng)c D N A ( B R l 3 B P ) ，G e n B a n k 登錄注冊(cè)號(hào)為A F 2 8 4 0 9 4 ．并對(duì)其結(jié)構(gòu)、組織表達(dá)譜作了分析，基因定位在1 2 q 2 4 ．2 - q t e r ．4，。／ 。， j關(guān)鍵詞：T N F 一血管內(nèi)皮細(xì)胞，R T - P C R , B R