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1、為了探討影響卵母細胞成熟潛能的原因,利用針對多種卵母細胞蛋白的單抗,分別進行卵母細胞內(nèi)顯微注射實驗以分析其阻斷孕酮誘導的卵母細胞成熟的生物效應,結(jié)果表明一種分子量為28kDa的蛋白(p28)與GVBD調(diào)節(jié)有關(guān);于是克隆了p28基因的cDNA全長.同源性比較發(fā)現(xiàn),p28屬于泛素羧基末端水解酶(ubiquitin carboxyl-terminalhydrolase,UCH)家族,和UCH L1的親緣關(guān)系最近.該文在過去的工作基礎(chǔ)上進一步研
2、究了p28在卵母細胞成熟過程中的作用機制.在大腸桿菌(DE3)中表達了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶融合蛋白(GST-p28),并用凝血酶切下p28部分;通過用針對天然p28的單克隆抗體檢測,發(fā)現(xiàn)重組表達的GST-p28和空載體表達的GST都未發(fā)生明顯的降解,適宜于p28的活性鑒定實驗.卵母細胞的免疫組化實驗表明,在各期卵母細胞中都含有p28,而且在濾泡細胞中也存在p28的高表達.隨著卵母細胞的生長,p28在核周圍有所聚集.蟾蜍p28除了以不依賴其UC
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