在體外成熟過程中豬卵丘細胞影響卵母細胞質(zhì)量的機理.pdf

1、本實驗以屠宰場豬卵巢為試驗材料，研究了不同培養(yǎng)條件下卵丘細胞(CumulusCells，CCs)對卵母細胞體外成熟發(fā)育的影響。 成熟發(fā)育結(jié)果表明：卵丘細胞(CumulusCells，CCs)可以提高卵母細胞孤雌激活后的發(fā)育潛力。周圍沒有卵丘細胞包被的卵母細胞(DenudedOocytes，DOs)經(jīng)成熟培養(yǎng)和孤雌激活后，囊胚率明顯低于來自同類卵泡的卵丘-卵母細胞復(fù)合體(Cumulus-OocyteComplex，COCs)。而當

2、DOs與分離的CCs(D+CCs)或者COCs(coDOs)共培養(yǎng)44h后，則會部分恢復(fù)發(fā)育潛力(p＜0.01)。此外，在44h的IVM結(jié)束時，DOs組的成熟率明顯低于COCs組(p＜0.01)，D+CCs組的成熟率可以部分增高，coDOs組的成熟率則可以提高到與COCs組相同的水平。進行GSH測定發(fā)現(xiàn)：經(jīng)過與CCs或者COCs共培養(yǎng)后，單個存活卵子內(nèi)的GSH含量與COCs組無差異，說明通過與兩種不同類型的卵丘細胞共培養(yǎng)后，可以使卵母細

3、胞完全的達到胞質(zhì)成熟。 IVM過程中，向介質(zhì)中加入不同濃度的半胱氨酸(Cysteine，Cys)時發(fā)現(xiàn)：在無Cys的介質(zhì)中DOs、D+CCs、coDOs組的成熟率無差異，均顯著低于COCs組(p＜0.05)，而加入一定量Cys后，除DOs組外，其他三個處理組的成熟率明顯升高(p＜0.05)。進行GSH測定發(fā)現(xiàn)：向介質(zhì)中添加一定量Cys對于D+CCs組單個存活卵子內(nèi)的GSH含量無影響(p＞0.05)，而對coDOs組的單個存活卵子

4、內(nèi)GSH含量則有顯著提高(p＜0.05)。 進行TUNEL細胞凋亡檢測時發(fā)現(xiàn)：在正常培養(yǎng)條件下，無論DOs組還是COCs組均不會發(fā)生凋亡。而在含有活性氧簇的介質(zhì)中培養(yǎng)44h后，DOs組卵母細胞在沒有任何保護機制下，凋亡程度極其嚴重，COCs組凋亡程度則輕的多，但是卵丘細胞凋亡不管在數(shù)量上還是程度上都很嚴重。當加入了抗氧化類藥物之后，DOs組卵母細胞凋亡程度明顯降低，而COCs組卵母細胞凋亡程度增加，卵丘細胞的凋亡程度和數(shù)量均有所